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[求助]
向各位大神請教一個簡單的問題，希望大牛不吝賜教
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| 假設(shè)，在工作中，偶然發(fā)現(xiàn)一種蛋白，這種蛋白免疫性很好，但是我不知道這個蛋白的序列，也不知道這個蛋白的名稱，現(xiàn)在我想知道用什么方式才能知道這個蛋白的名稱或者序列，并用什么方式才能反推出這個蛋白對應(yīng)的基因序列，并利用這個序列設(shè)計引物，進而克隆，擴增，之后轉(zhuǎn)到質(zhì)粒，擴增蛋白，希望能有人幫我詳細的講解一下 |
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lxj341401
至尊木蟲 (著名寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金幣+5, EPI+1): 2011-06-30 18:45:22
完美人生3062(金幣+1): 謝謝你的賜教，受用了 2011-07-07 09:54:43
dhd997(金幣+5, EPI+1): 2011-06-30 18:45:22
完美人生3062(金幣+1): 謝謝你的賜教，受用了 2011-07-07 09:54:43
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首先，即使知道蛋白序列也是推不出基因序列的，氨基酸和核苷酸之間是一對多的關(guān)系，因為一個氨基酸有多個密碼子可以編碼。 根據(jù)你蛋白的性質(zhì)查文獻，看看有沒有人報道過相關(guān)蛋白，從而得到一些信息。 如果查不到相關(guān)信息，但你說的東西基本可以做，基本過程如下：先純化出該蛋白，然后進行蛋白質(zhì)N端測序和肽譜圖分析，根據(jù)這些信息設(shè)計兼并引物，擴增出部分基因片段，然后RACE獲得全長基因（如果能N端測序和C端測序都進行最好，就可以設(shè)計引物獲得全長基因）。 |
2樓2011-06-30 09:39:36
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