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1104水金蟲 (正式寫手)
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[求助]
水痘病毒Ellen株(ATCC VR-1367)的復(fù)蘇、凍存
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實(shí)驗(yàn)室新購(gòu)買了水痘病毒Ellen株(ATCC VR-1367)，但是說明說給的很簡(jiǎn)略，之前也沒操作過，所以想請(qǐng)教高手。不勝感激�。。� 1、打算用MRC-5細(xì)胞復(fù)蘇，復(fù)蘇時(shí)接菌量怎么定呢？ 當(dāng)細(xì)胞單層后（25平方厘米的培養(yǎng)瓶），倒掉培養(yǎng)液，用1*PBS洗滌細(xì)胞面，然后將病毒（1ml）加入到培養(yǎng)瓶，吸附，再加入10ml的維持液進(jìn)行培養(yǎng)。這么操作對(duì)么？ 如果病毒是凍干粉，要用什么液體進(jìn)行復(fù)溶呢？ 2、收毒后進(jìn)行凍存，想用兩種方法，有細(xì)胞懸液和無細(xì)胞懸液兩種方法。因?yàn)橄乱徊较胗貌《久庖邉?dòng)物，以獲得血清，那么加入何種保護(hù)劑不影響毒力呢？保護(hù)劑的比例（最終比例）是多少？?jī)煞N凍存的方法加入的保護(hù)劑可以相同么？ 凍存時(shí)需要梯度降溫么？我們打算-80度或者液氮凍存 凍存液用什么呢？ |
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