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1104水金蟲 (正式寫手)
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[求助]
水痘病毒Ellen株(ATCC VR-1367)的復蘇、凍存
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實驗室新購買了水痘病毒Ellen株(ATCC VR-1367)，但是說明說給的很簡略，之前也沒操作過，所以想請教高手。不勝感激�。�！ 1、打算用MRC-5細胞復蘇，復蘇時接菌量怎么定呢？ 當細胞單層后（25平方厘米的培養(yǎng)瓶），倒掉培養(yǎng)液，用1*PBS洗滌細胞面，然后將病毒（1ml）加入到培養(yǎng)瓶，吸附，再加入10ml的維持液進行培養(yǎng)。這么操作對么？ 如果病毒是凍干粉，要用什么液體進行復溶呢？ 2、收毒后進行凍存，想用兩種方法，有細胞懸液和無細胞懸液兩種方法。因為下一步想用病毒免疫動物，以獲得血清，那么加入何種保護劑不影響毒力呢？保護劑的比例（最終比例）是多少？兩種凍存的方法加入的保護劑可以相同么？ 凍存時需要梯度降溫么？我們打算-80度或者液氮凍存 凍存液用什么呢？ |
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