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放線菌的培養(yǎng)（天青鏈霉菌）
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最近一直在做放線菌，有一段時間了，偶爾發(fā)現(xiàn)有的搖瓶出現(xiàn)染菌現(xiàn)象，還就是我們是實驗室，想做批好點的種子上個發(fā)酵罐實驗下，想向蟲友有這方面經(jīng)驗的請教些問題: 1、我想在搖瓶培養(yǎng)（目前用的是改良高氏1號培養(yǎng)基和PDA）時候在培養(yǎng)基里加入點抑制劑（如10%酚/3%重鉻酸鉀溶液）不知道對種子影響大不，會產(chǎn)生變異嗎？ 2、如果投入生產(chǎn)中，上發(fā)酵罐，考慮到生長周期長，極易出現(xiàn)污染，我是否可以發(fā)酵罐同樣加入抑制劑？做出來的菌種會變異不? 3、請教下最佳培養(yǎng)條件，如溫度、通氣量、PH、轉(zhuǎn)速等。 希望有這方面經(jīng)驗前輩、學(xué)長多指教，不勝感激。 |
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wgy2007
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【答案】應(yīng)助回帖
kissyls(金幣+5): 你好，我可以加你QQ嗎？方便像你請教，謝謝�。ㄎ业�278975457） 2011-07-05 09:42:11
kissyls(金幣+10): 2011-07-11 01:11:09
kissyls(金幣+10): 2011-07-11 01:11:09
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1. 我做的是放線菌，菌種的不同，代謝產(chǎn)物的不同，控制條件可能是不一樣的，應(yīng)該根據(jù)實驗來確定，我做的發(fā)酵培養(yǎng)基滅菌前pH也是調(diào)到7.5，滅菌后的pH在6.7～7.1左右，我說的pH6.0是發(fā)酵過程控制；我做的放射線菌耗氧量比較大，發(fā)酵液比較粘稠，所以通風(fēng)比、攪拌轉(zhuǎn)速相對大一些。 2. 種子培養(yǎng)基一般用蛋白胨、鹽、葡萄糖，發(fā)酵培養(yǎng)基用大豆分離蛋白、酵母浸粉、葡萄糖及一些無機鹽、微量元素等。不同的發(fā)酵產(chǎn)品使用的原料是不同的，可以查一些相關(guān)的文獻。 3. 培養(yǎng)孢子是用茄子瓶培養(yǎng)的，一般培養(yǎng)7～10天，長出孢子后放4度左右的冰箱保存?zhèn)溆谩?br /> 4. 關(guān)于培養(yǎng)放射線菌結(jié)球的問題我在培養(yǎng)搖瓶種子的時候也出現(xiàn)過，可以在配制培養(yǎng)基是在瓶內(nèi)加10粒左右的玻璃珠即可解決。在實驗罐內(nèi)培養(yǎng)，攪拌轉(zhuǎn)速高一些是不會結(jié)球的。 |
7樓2011-07-01 11:37:54
wgy2007
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【答案】應(yīng)助回帖
kissyls(金幣+10): 謝謝你的幫助，還希望多多指教 2011-06-30 17:11:38
rainwander(EPI+1): 2011-06-30 19:31:39
rainwander(EPI+1): 2011-06-30 19:31:39
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我的建議是不要添加抑制劑， 1.增加發(fā)酵成本； 2.提取產(chǎn)品時添加的抑制劑能否處理干凈，抑制劑對產(chǎn)品的質(zhì)量是否會有影響。 3.添加這么高濃度的抑制劑我感覺對放線菌可能會起到抑制作用。 我是做生產(chǎn)的，提供幾點建議供參考： 1.菌種純化。 2.培養(yǎng)基滅菌控制好，使培養(yǎng)基保證無菌。如果培養(yǎng)基中不溶物較多可以適當(dāng)提高滅菌溫度或延長滅菌時間。 3.無菌操作嚴(yán)格，保證在接種的過程中不帶入其它的微生物。 4.環(huán)境滅菌（包括無菌室、搖床間、搖床等要經(jīng)常用消毒液殺菌后再用紫外線滅菌）。 5.不知你的放線菌是否產(chǎn)孢子，如果產(chǎn)孢子可以用孢子懸液直接接種種子罐，可以不用搖瓶培養(yǎng)種子。如果必須用搖瓶培養(yǎng)種子我建議加厚紗布塞或在紗布塞中間加棉花或直接用棉塞，在棉塞的外部加幾層紗布。 以前我培養(yǎng)放線菌搖瓶種子的時候，也是總出現(xiàn)個別瓶染菌的情況，查了很多，最后將紗布塞改成棉塞好了，再也沒有染過菌。 |
2樓2011-06-30 15:16:01
wgy2007
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4樓2011-06-30 17:11:00
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