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放線菌的培養(yǎng)(天青鏈霉菌)
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最近一直在做放線菌,有一段時間了,偶爾發(fā)現(xiàn)有的搖瓶出現(xiàn)染菌現(xiàn)象,還就是我們是實驗室,想做批好點的種子上個發(fā)酵罐實驗下,想向蟲友有這方面經驗的請教些問題: 1、我想在搖瓶培養(yǎng)(目前用的是改良高氏1號培養(yǎng)基和PDA)時候在培養(yǎng)基里加入點抑制劑(如10%酚/3%重鉻酸鉀溶液)不知道對種子影響大不,會產生變異嗎? 2、如果投入生產中,上發(fā)酵罐,考慮到生長周期長,極易出現(xiàn)污染,我是否可以發(fā)酵罐同樣加入抑制劑?做出來的菌種會變異不? 3、請教下最佳培養(yǎng)條件,如溫度、通氣量、PH、轉速等。 希望有這方面經驗前輩、學長多指教,不勝感激。 |
微生物 |

木蟲 (小有名氣)
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我的建議是不要添加抑制劑, 1.增加發(fā)酵成本; 2.提取產品時添加的抑制劑能否處理干凈,抑制劑對產品的質量是否會有影響。 3.添加這么高濃度的抑制劑我感覺對放線菌可能會起到抑制作用。 我是做生產的,提供幾點建議供參考: 1.菌種純化。 2.培養(yǎng)基滅菌控制好,使培養(yǎng)基保證無菌。如果培養(yǎng)基中不溶物較多可以適當提高滅菌溫度或延長滅菌時間。 3.無菌操作嚴格,保證在接種的過程中不帶入其它的微生物。 4.環(huán)境滅菌(包括無菌室、搖床間、搖床等要經常用消毒液殺菌后再用紫外線滅菌)。 5.不知你的放線菌是否產孢子,如果產孢子可以用孢子懸液直接接種種子罐,可以不用搖瓶培養(yǎng)種子。如果必須用搖瓶培養(yǎng)種子我建議加厚紗布塞或在紗布塞中間加棉花或直接用棉塞,在棉塞的外部加幾層紗布。 以前我培養(yǎng)放線菌搖瓶種子的時候,也是總出現(xiàn)個別瓶染菌的情況,查了很多,最后將紗布塞改成棉塞好了,再也沒有染過菌。 |
木蟲 (小有名氣)



木蟲 (小有名氣)
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1. 我做的是放線菌,菌種的不同,代謝產物的不同,控制條件可能是不一樣的,應該根據實驗來確定,我做的發(fā)酵培養(yǎng)基滅菌前pH也是調到7.5,滅菌后的pH在6.7~7.1左右,我說的pH6.0是發(fā)酵過程控制;我做的放射線菌耗氧量比較大,發(fā)酵液比較粘稠,所以通風比、攪拌轉速相對大一些。 2. 種子培養(yǎng)基一般用蛋白胨、鹽、葡萄糖,發(fā)酵培養(yǎng)基用大豆分離蛋白、酵母浸粉、葡萄糖及一些無機鹽、微量元素等。不同的發(fā)酵產品使用的原料是不同的,可以查一些相關的文獻。 3. 培養(yǎng)孢子是用茄子瓶培養(yǎng)的,一般培養(yǎng)7~10天,長出孢子后放4度左右的冰箱保存?zhèn)溆谩?br /> 4. 關于培養(yǎng)放射線菌結球的問題我在培養(yǎng)搖瓶種子的時候也出現(xiàn)過,可以在配制培養(yǎng)基是在瓶內加10粒左右的玻璃珠即可解決。在實驗罐內培養(yǎng),攪拌轉速高一些是不會結球的。 |
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我做的金色鏈霉菌,母瓶分別置于大小搖床上培養(yǎng)轉速230(大搖床進口,小搖床國產,大搖床偏心距較大),培養(yǎng)兩天后離心測母瓶菌濃,發(fā)現(xiàn)上清液差異很大,什么原因呢?中間的是大搖床上培養(yǎng)的母瓶。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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