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放線菌的培養(yǎng)（天青鏈霉菌）
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最近一直在做放線菌，有一段時(shí)間了，偶爾發(fā)現(xiàn)有的搖瓶出現(xiàn)染菌現(xiàn)象，還就是我們是實(shí)驗(yàn)室，想做批好點(diǎn)的種子上個(gè)發(fā)酵罐實(shí)驗(yàn)下，想向蟲友有這方面經(jīng)驗(yàn)的請(qǐng)教些問題: 1、我想在搖瓶培養(yǎng)（目前用的是改良高氏1號(hào)培養(yǎng)基和PDA）時(shí)候在培養(yǎng)基里加入點(diǎn)抑制劑（如10%酚/3%重鉻酸鉀溶液）不知道對(duì)種子影響大不，會(huì)產(chǎn)生變異嗎？ 2、如果投入生產(chǎn)中，上發(fā)酵罐，考慮到生長周期長，極易出現(xiàn)污染，我是否可以發(fā)酵罐同樣加入抑制劑？做出來的菌種會(huì)變異不? 3、請(qǐng)教下最佳培養(yǎng)條件，如溫度、通氣量、PH、轉(zhuǎn)速等。 希望有這方面經(jīng)驗(yàn)前輩、學(xué)長多指教，不勝感激。 |
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8樓2012-11-20 18:58:52
wgy2007
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【答案】應(yīng)助回帖
kissyls(金幣+10): 謝謝你的幫助，還希望多多指教 2011-06-30 17:11:38
rainwander(EPI+1): 2011-06-30 19:31:39
rainwander(EPI+1): 2011-06-30 19:31:39
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我的建議是不要添加抑制劑， 1.增加發(fā)酵成本； 2.提取產(chǎn)品時(shí)添加的抑制劑能否處理干凈，抑制劑對(duì)產(chǎn)品的質(zhì)量是否會(huì)有影響。 3.添加這么高濃度的抑制劑我感覺對(duì)放線菌可能會(huì)起到抑制作用。 我是做生產(chǎn)的，提供幾點(diǎn)建議供參考： 1.菌種純化。 2.培養(yǎng)基滅菌控制好，使培養(yǎng)基保證無菌。如果培養(yǎng)基中不溶物較多可以適當(dāng)提高滅菌溫度或延長滅菌時(shí)間。 3.無菌操作嚴(yán)格，保證在接種的過程中不帶入其它的微生物。 4.環(huán)境滅菌（包括無菌室、搖床間、搖床等要經(jīng)常用消毒液殺菌后再用紫外線滅菌）。 5.不知你的放線菌是否產(chǎn)孢子，如果產(chǎn)孢子可以用孢子懸液直接接種種子罐，可以不用搖瓶培養(yǎng)種子。如果必須用搖瓶培養(yǎng)種子我建議加厚紗布塞或在紗布塞中間加棉花或直接用棉塞，在棉塞的外部加幾層紗布。 以前我培養(yǎng)放線菌搖瓶種子的時(shí)候，也是總出現(xiàn)個(gè)別瓶染菌的情況，查了很多，最后將紗布塞改成棉塞好了，再也沒有染過菌。 |
2樓2011-06-30 15:16:01
wgy2007
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3樓2011-06-30 15:22:47
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灰常感謝你的建議，對(duì)于添加抑制劑我也考慮過，現(xiàn)在是實(shí)驗(yàn)階段也許會(huì)沒事，可以順利生產(chǎn)出來，如果轉(zhuǎn)大的發(fā)酵罐成本太高，也許不切實(shí)際，還有不確定因數(shù)，到底對(duì)放線菌影響多大。 還就是你的建議不錯(cuò)，我目前最有可能的就是搖瓶培養(yǎng)環(huán)境問題或者是搖瓶紗布太薄了。環(huán)境問題不大，沒太多影響我多注意下；我也懷疑過紗布太薄，畢竟生長周期太長了，極易污染。 感謝你的建議 1、我在把培養(yǎng)間滅下菌，盡量做到周邊無菌 2、嘗試下棉塞或者增加紗布的厚度。 |
4樓2011-06-30 17:11:00
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