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friya0910新蟲 (正式寫手)
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[交流]
測(cè)序的問(wèn)題 已有5人參與
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| 想請(qǐng)教一下大家一般測(cè)序公司的準(zhǔn)確率是多少啊?需要測(cè)重復(fù)嗎? |
新蟲 (正式寫手)
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怎么說(shuō)呢,我的目的片段是297bp,然后送三個(gè)樣,測(cè)出來(lái)有三個(gè)位點(diǎn)是不一樣的,有的是1、2一樣,3不一樣,有的是2、3一樣,1不一樣;翻譯成蛋白,1和2完全一樣,3號(hào)有一個(gè)位點(diǎn)和它們不一樣;我剛咨詢了一下公司,說(shuō)他們的酶的保真性能達(dá)到95%以上,不應(yīng)該是錯(cuò)配。測(cè)序的峰圖也挺好的。選了兩個(gè)樣重測(cè)以后還是和以前一樣,應(yīng)該可以排除測(cè)序出現(xiàn)錯(cuò)誤的問(wèn)題。還有弱弱的問(wèn)一下,什么叫剪切子不一樣? |
至尊木蟲 (著名寫手)
新蟲 (正式寫手)
至尊木蟲 (著名寫手)
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應(yīng)該不是測(cè)序的問(wèn)題,現(xiàn)在測(cè)序結(jié)果還是比較可信的。三個(gè)單克隆三個(gè)不同結(jié)果也可以理解,基因應(yīng)該是單拷貝的,都連進(jìn)去了,但連的是不同的基因,是前面實(shí)驗(yàn)的問(wèn)題。三個(gè)里面如果有一個(gè)是你要的,就挑取那個(gè)單克隆,其他兩個(gè)單克隆都不要了,繼續(xù)后面實(shí)驗(yàn),如果都不是你要的,就挑別的單克隆去測(cè)序了或者重新轉(zhuǎn)化了。 |
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