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正向突變率計(jì)算 已有1人參與
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| 我想問一下,正向突變率計(jì)算的時(shí)候,比對(duì)照組D/d大的,該怎么取,是比較平均值還是最大值呢?還有,每次都要做稀釋梯度,是不是為了找分離的比較好的,菌落比較清晰均勻的呢? |
專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
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專家經(jīng)驗(yàn): +248 |

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因?yàn)樵谡T變篩選突變株的時(shí)候候選菌株太多,所以必須設(shè)定一個(gè)明顯且易測(cè)量的參數(shù)作為指標(biāo),但是降解圈和菌落直徑比只能是初步篩選的指標(biāo),還要選定比值比出發(fā)菌株大的誘變株進(jìn)行再次篩選。再次篩選的時(shí)候?yàn)榘l(fā)酵產(chǎn)酶能力的比較,才能確定出在直徑比例變大的誘變株里哪些是正突變株。比出發(fā)菌株產(chǎn)酶提高達(dá)到顯著水平的才能算正突變株,達(dá)不到顯著水平或者低于的為負(fù)突變株,但是負(fù)突變株包括在平板上測(cè)定直徑比低于出發(fā)菌株的誘變株。例如一共有100個(gè)誘變株,其中10個(gè)直徑比大于出發(fā)菌株,這10個(gè)菌株經(jīng)過產(chǎn)酶實(shí)驗(yàn)后得到2株比出發(fā)菌株顯著提高的,則正突變率為2%。 出發(fā)菌株的直徑比為涂布平板,取多個(gè)出發(fā)菌株菌落的均值,作為標(biāo)準(zhǔn)用于與每個(gè)誘變株的個(gè)體相比較,誘變株沒有均值的說法。 誘變之后,每次都要做稀釋梯度,是為了找菌落比較清晰均勻的,每塊平板上生長(zhǎng)的菌落個(gè)數(shù)適當(dāng),降解圈不互相重疊的一個(gè)稀釋梯度,再用這個(gè)稀釋梯度來大量涂布平板,用直徑比來初步篩選正突變株。 |

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