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xiajing_acm

新蟲 (小有名氣)

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專業(yè): 抗腫瘤藥物藥理

[求助] 流式用來調(diào)整儀器參數(shù)的對照組細(xì)胞的制備問題

各位大俠：
   你們好！
   小弟在流式檢測調(diào)整參數(shù)方面有幾點疑問，請大家?guī)臀医獯鹨幌�，謝謝！
   1、每次流失檢測是不是都必須要進(jìn)行儀器參數(shù)，比如電壓、補(bǔ)償?shù)鹊恼{(diào)節(jié)呢？不調(diào)節(jié)參數(shù)的話，對實驗本身會有多大的影響呢？數(shù)據(jù)可以使用嗎？
   2、用同類型的protocol，比如同為抗腫瘤的另一種藥物誘導(dǎo)同一種細(xì)胞周期阻滯或者凋亡的protocol可以進(jìn)行這種藥物的檢測嗎？
   3、PI單染做周期檢測時儀器的參數(shù)的調(diào)節(jié)需不需要單獨使用對照組來進(jìn)行呢？不需要的話是怎么調(diào)節(jié)的呢？
   4、Annexin V-PI等的雙染或者多染的時候好像是需要未染任何一種染料的細(xì)胞作為陰性對照來調(diào)節(jié)電壓，那么這個細(xì)胞應(yīng)該是用沒有加藥的空白組細(xì)胞吧？用單染的細(xì)胞來調(diào)節(jié)補(bǔ)償?shù)臅r候應(yīng)該用單染陽性的細(xì)胞呢還是也用未加藥的空白組細(xì)胞呢？如果用單染陽性的細(xì)胞，那么這種細(xì)胞該怎么誘導(dǎo)產(chǎn)生呢？
   以上問題一直很困惑，請大家?guī)蛶兔�！非常感謝！

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1樓 2011-07-15 19:22:07

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崔敏

新蟲 (初入文壇)

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專業(yè): 抗腫瘤藥物藥理

【答案】應(yīng)助回帖

★
xiajing_acm(金幣+2): 謝謝你，“沒加藥的空白細(xì)胞Annexin V單染和PI單染的調(diào)補(bǔ)償”，這樣的細(xì)胞敢確定一定有Annexin V和PI的信號嗎？因為空白組細(xì)胞有凋亡和壞死的細(xì)胞有也不會很多啊！ 2011-07-16 23:20:58
qinhy(金幣+1): 謝謝應(yīng)助回帖~ 2011-07-17 09:27:42
xiajing_acm(金幣+3): 2011-08-10 14:00:12

1.可以每次調(diào)也可以直接調(diào)出以前做的模板測，但是不同的細(xì)胞參數(shù)設(shè)置不同
2.不明白什么意思
3.對照的處理方式也要跟加藥組一樣，用對照調(diào)好參數(shù)之后才能測加藥組的
4.做凋亡的沒加藥的空白細(xì)胞要有四組：不處理的；Annexin V單染的；PI單染的；雙染的，前三個是調(diào)參數(shù)的，沒加藥的空白細(xì)胞Annexin V單染和PI單染的調(diào)補(bǔ)償。

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回復(fù)此樓

2樓2011-07-16 16:34:45

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