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xiajing_acm

新蟲 (小有名氣)

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[求助] 流式用來調(diào)整儀器參數(shù)的對照組細胞的制備問題

各位大俠：
   你們好！
   小弟在流式檢測調(diào)整參數(shù)方面有幾點疑問，請大家?guī)臀医獯鹨幌�，謝謝！
   1、每次流失檢測是不是都必須要進行儀器參數(shù)，比如電壓、補償?shù)鹊恼{(diào)節(jié)呢？不調(diào)節(jié)參數(shù)的話，對實驗本身會有多大的影響呢？數(shù)據(jù)可以使用嗎？
   2、用同類型的protocol，比如同為抗腫瘤的另一種藥物誘導(dǎo)同一種細胞周期阻滯或者凋亡的protocol可以進行這種藥物的檢測嗎？
   3、PI單染做周期檢測時儀器的參數(shù)的調(diào)節(jié)需不需要單獨使用對照組來進行呢？不需要的話是怎么調(diào)節(jié)的呢？
   4、Annexin V-PI等的雙染或者多染的時候好像是需要未染任何一種染料的細胞作為陰性對照來調(diào)節(jié)電壓，那么這個細胞應(yīng)該是用沒有加藥的空白組細胞吧？用單染的細胞來調(diào)節(jié)補償?shù)臅r候應(yīng)該用單染陽性的細胞呢還是也用未加藥的空白組細胞呢？如果用單染陽性的細胞，那么這種細胞該怎么誘導(dǎo)產(chǎn)生呢？
   以上問題一直很困惑，請大家?guī)蛶兔玻》浅８兄x！

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1樓 2011-07-15 19:22:07

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

崔敏

新蟲 (初入文壇)

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專業(yè): 抗腫瘤藥物藥理

【答案】應(yīng)助回帖

★
xiajing_acm(金幣+2): 謝謝你，“沒加藥的空白細胞Annexin V單染和PI單染的調(diào)補償”，這樣的細胞敢確定一定有Annexin V和PI的信號嗎？因為空白組細胞有凋亡和壞死的細胞有也不會很多啊！ 2011-07-16 23:20:58
qinhy(金幣+1): 謝謝應(yīng)助回帖~ 2011-07-17 09:27:42
xiajing_acm(金幣+3): 2011-08-10 14:00:12

1.可以每次調(diào)也可以直接調(diào)出以前做的模板測，但是不同的細胞參數(shù)設(shè)置不同
2.不明白什么意思
3.對照的處理方式也要跟加藥組一樣，用對照調(diào)好參數(shù)之后才能測加藥組的
4.做凋亡的沒加藥的空白細胞要有四組：不處理的；Annexin V單染的；PI單染的；雙染的，前三個是調(diào)參數(shù)的，沒加藥的空白細胞Annexin V單染和PI單染的調(diào)補償。

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2樓2011-07-16 16:34:45