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| 本帖產(chǎn)生 1 個(gè) BioEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | ||
冰釋櫻釋新蟲 (初入文壇)
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[求助]
斑點(diǎn)雜交的一些疑問
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各位大蝦們好！我是新手，有問題求助，急！ 我正準(zhǔn)備做斑點(diǎn)雜交，計(jì)劃是同一個(gè)mRNA模板和10條不同的經(jīng)熒光標(biāo)記的寡核苷酸探針雜交，可以在同一張膜上做嗎？各個(gè)探針之間會不會產(chǎn)生干擾？需不需要分開來一個(gè)膜做一個(gè)探針？ 希望能得到大家的指點(diǎn)！不勝感激！ |
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yuandian114
銀蟲 (初入文壇)
- BioEPI: 3
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 294.6
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- 蟲號: 1344876
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- 專業(yè): 生物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
amisking(金幣+3, EPI+1): 鼓勵應(yīng)助 2011-07-16 20:27:41
amisking(金幣+3, EPI+1): 鼓勵應(yīng)助 2011-07-16 20:27:41
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可以的，結(jié)合了待測RNA的膜與探針雜交后可經(jīng)堿變性或熱變性的方法將探針洗脫，膜可反復(fù)使用與其他探針雜交。。 具體方法如下： 雜交的膜（注意：雜交過的膜在保存過程中不能干燥，否則探針將會與膜形成不可逆的結(jié)合）置于100°C 0.5%SDS中煮沸3min，自然冷卻至室溫后，將膜放入雙蒸水中漂洗2~3遍。取出膜，用濾紙吸去膜表面的水分。將膜直接進(jìn)行另一探針的雜交或用保鮮膜包好，室溫下真空保存。 |
2樓2011-07-16 19:28:48
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3樓2017-08-19 08:42:48
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4樓2017-08-21 07:09:12
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5樓2017-08-22 10:48:23
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