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mamjun金蟲 (小有名氣)
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圖例請(qǐng)教聚合酶(Taq酶)外切和內(nèi)切具體怎么起作用的,急!
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有一個(gè)莖環(huán)狀引物,其與模板結(jié)合的圖形我大致畫成這個(gè)樣子: (模板) 5’******************************************3‘ 3’ ******************======) 5‘======) (莖環(huán)引物) 說(shuō)明:引物一部分和模板退火結(jié)合,右邊的另一部分自己形成莖環(huán)結(jié)構(gòu) 我想問(wèn)得問(wèn)題是:如果PCR擴(kuò)增的時(shí)候,Taq酶會(huì)吧引物5‘端的莖環(huán)結(jié)構(gòu)給切掉嗎,普通的Taq沒(méi)有3’到5‘外切活性吧? 那能切除莖環(huán)結(jié)構(gòu)的是3’到5‘外切活性,還是5’→3‘外切活性啊?所以說(shuō)事我搞不明白5’→3’和3‘→5’外切究竟是怎么回事,怎么具體起作用的,謝謝!! 追問(wèn):如果不想莖環(huán)結(jié)構(gòu)被某種外切活性給切除掉,需要在5‘端添加修飾基團(tuán)的話,添加什么修飾呢? [ Last edited by mamjun on 2011-7-21 at 08:21 ] |
金蟲 (正式寫手)
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金蟲 (正式寫手)
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