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wanghuiling新蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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新 C18的使用
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| 新C18柱子該注意什么呢?流動(dòng)相是2%乙腈,用磷酸緩沖液調(diào)制pH2的混合液。第一次使用這根C18柱,尋求洗脫方法,謝謝~ |

金蟲(chóng) (小有名氣)
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1、新柱的處理:我們每次新買(mǎi)的柱子雖然是經(jīng)廠家測(cè)試過(guò)并密封好 的,可是有的柱子到達(dá)手中時(shí)已經(jīng)過(guò)很長(zhǎng)的時(shí)間了,因此,我們每拿 到一根新的色譜柱都必須要對(duì)柱子進(jìn)行處理。首先,是配制好 65% 的乙腈/水,再把色譜柱正確的連接在色譜儀上,出口放空(注意: 出口端切不可連上檢測(cè)器,以免污染了檢測(cè)器) 以低流速 , 0.1ml/min~0.5ml/min(如果是 LC/MC 柱子,則應(yīng)以 0.3 ml/min 進(jìn)行) 均可,不可以高流速進(jìn)行,等看見(jiàn)柱子出口有液體流出后,過(guò) 20 分 鐘后再接上檢測(cè)器,以循序漸進(jìn)的方法將流速調(diào)至 1.0ml/min(如果 是 LC/MC 柱子則應(yīng)以 0.3 ml/min 進(jìn)行),繼續(xù)沖洗 2~8 小時(shí)。 2、新柱的使用:首先我們確認(rèn)所分析樣品流動(dòng)相的 PH 是不是在色 譜柱 PH 的耐受范圍之內(nèi),以免損傷柱子!如果,確認(rèn)在柱子的使用范 圍之內(nèi),就用做樣品的流動(dòng)相平衡柱子(如果流動(dòng)相中含用緩沖鹽溶 液,在平衡柱子之前務(wù)必要先用 5%甲醇或 5%乙腈去過(guò)渡 30 分鐘以 上。再用帶鹽的流動(dòng)相去平衡色譜柱。)當(dāng)色譜柱平衡了足夠時(shí)間, 基線非常平穩(wěn)的時(shí)候,方可進(jìn)樣分析。 3、色譜柱清洗:①如果樣品分析中只用到一般的乙腈、甲醇和水的 流動(dòng)相,在做完樣品之后可直接用 55%~65%乙腈/水或者用 55%~65% 甲醇/水沖洗色譜柱 40~80 分鐘,然后以純甲醇或乙腈沖洗 30 分鐘, 即可保存;②如果樣品分中流動(dòng)相里含用緩沖液或酸或離子對(duì)試劑的 流動(dòng)相,在做完樣品之后的清洗必須按照如下步驟進(jìn)行清洗柱子:先 用 5%的甲醇/水或 5%的乙腈/水,以 1ml/min,沖洗 1.5 小時(shí)以上(如果 色譜柱更長(zhǎng), 則還需要增加適當(dāng)時(shí)間);然后用 55%甲醇/~水 65%/水沖 洗色譜柱 30~60 分鐘.最后用甲醇或乙腈以 1ml蒸餾水/min 沖洗 30 分鐘。 備注:甲醇、乙腈要用色譜純。水用是重 |
金蟲(chóng) (小有名氣)
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