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做薄層分析時,展開劑需要怎么飽和?
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做薄層分析時,需要用展開劑飽和20~30min左右。 是先把展開劑倒入層析缸,飽和好后,再迅速把板放入層析缸, 還是在雙槽層析缸的一側放上展開劑,另一側放上板(這一側不放一點展開劑,保持干燥),飽和好后,小心地將展開劑傾倒在放有板的一側,進行展開! 哪種操作是正確的,還是皆可? 請大家賜教!謝謝 |
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飽和分為2部分: 1、展開缸的飽和:在展開之前,使展開劑蒸汽在展開缸內飽和,使展開缸汽液狀態(tài)達到一定的穩(wěn)定狀態(tài),此時尚未放薄層板。 2、薄層板的飽和:在展開缸飽和后,放入已經點樣完畢的薄層板,進行飽和,此時薄層板不接觸展開劑的,使薄層板整體差異性減小。 哪些條件下需要飽和: 1、展開劑含低沸點的:如展開劑含石油醚(30-60,60-90)、乙醚等; 2、展開劑組成比較復雜的:如3-4種有機試劑; 3、展開劑是水飽和后或有機試劑飽和水的:有如正丁醇飽和的水或水飽和正丁醇,尤其是在做皂苷類分離的時候,很重要; 4、展開缸大小與薄層板大小差異大的:一般缸大于板寬度的3倍,高度2倍的 5、平行樣品點多:如一塊板點5個以上的樣品點;; 6、其它發(fā)生邊緣效應的…… 關于飽和時間:根據展開劑而定。 1、展開劑組分極性差異不大的且揮發(fā)性好的,時間可以短一些,一般15-20分鐘即可; 2、極性差異大的,且揮發(fā)性差異大的,時間要長一些,一般要30-60分鐘; 3、極性差異大的,且揮發(fā)性差異不大的,時間要長一些,一般要20-30分鐘; 4、極性差異不大,且揮發(fā)性差不大的,時間可以短一些,一般要10-15分鐘; 5、水飽和有機試劑或有機試劑飽和水的,時間一般都比較長,30-60分鐘。 6、另外,大家打開關閉展開缸的速度要快,放板取板的速度也要快,否則預飽和的效果全被你后期的操作給抹殺了!! 不足之處,請多海涵 |
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