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小七咯新蟲 (初入文壇)
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[求助]
抽病毒DNA做熒光定量，陰性老是不成立，怎么辦
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| 我用試劑盒抽病毒DNA之后，要做熒光定量PCR，但是結(jié)果老是不理想。用水一個(gè)抽的陰性對(duì)照的CT值總是在30-35之間，不知道怎么避免這種污染（配體系時(shí)是沒有污染的，可以確定是抽的過程當(dāng)中存在污染）。 |
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西瓜
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adslye(金幣+2): 西瓜說的就是我想說的，但萬一不她是染料法。提問帖標(biāo)準(zhǔn)提問格式可以做下一個(gè)活動(dòng)。 2011-08-14 09:37:38
adslye(金幣+2): 西瓜說的就是我想說的，但萬一不她是染料法。提問帖標(biāo)準(zhǔn)提問格式可以做下一個(gè)活動(dòng)。 2011-08-14 09:37:38
| 除了污染，還有可能是引物二聚體。跑完之后可以看看融解曲線，如果是有污染，那么出現(xiàn)的峰應(yīng)該和你樣品的峰位置是一樣的（產(chǎn)物一樣）；如果是引物二聚體，那么會(huì)在溫度較低的地方出現(xiàn)峰。也可以跑瓊脂糖凝膠電泳，如果是引物二聚體，可以在100bp或者更低的地方看到彌散模糊的條帶，而污染的話條帶應(yīng)該是很清晰的。 |
7樓2011-08-14 00:39:29
gloryping
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2樓2011-08-12 14:38:01
小七咯
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3樓2011-08-12 15:56:53
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【答案】應(yīng)助回帖
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小七咯(金幣+1): 2011-08-13 09:49:15
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http://www.dxy.cn/bbs/thread/10629297#10629297 丁香園上一帖子 你看看吧 希望能幫到你 |
4樓2011-08-12 16:12:52
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