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yuehuashou新蟲 (初入文壇)
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[求助]
SDS-PAGE
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| 昨天做SDS-PAGE,結(jié)果:marker的條帶清晰,比上樣孔稍寬,卻沒有出現(xiàn)樣品條帶,分離膠內(nèi)出現(xiàn)了大面積彌散,且彌散邊緣染色明顯較深。跑膠的時(shí)候觀察到各泳道溴酚藍(lán)相連呈波浪狀(每樣品孔上樣量不同,是否與此相關(guān))。跑膠用的所有試劑都是一周前配的。求高手分析結(jié)果的原因。 |
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你說marker有條帶,但是既然比上樣孔寬,說明也彌散了。如此分析,可能是膠不均勻,散的如此嚴(yán)重,我認(rèn)為只有一種可能,那就是網(wǎng)孔壓根沒有成型,這個(gè)問題只能怪藥品了,你說藥品是剛配的,但不代表沒問題。 丙烯酰胺30%的很重要,但是一般不會(huì)出問題,它是形成網(wǎng)孔的前體物質(zhì),在催化劑APS和TEMED催化下,會(huì)形成聚丙烯酰胺,根據(jù)不同的濃度,會(huì)形成不同網(wǎng)孔的膠。所以,APS與TEMED呢,也容易失效,APS要密封干燥保存,TEMED也最好分裝,拿一小瓶出來用就行了。自己可以做個(gè)試驗(yàn)看看是否是藥品問題,如果APS不行,會(huì)影響網(wǎng)孔的成形,如果是TEMED不行,會(huì)影響凝膠時(shí)間。 |


木蟲 (小有名氣)
阿郎哥

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