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小酒窩7988銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
液相色譜峰前沿問題
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如圖為什么有得峰會(huì)前沿 有得又不會(huì)前沿（第一個(gè)峰基本不前沿，后面的都有點(diǎn)前稀釋效應(yīng)） 那應(yīng)該怎么解決 |
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hongyan0104
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2樓2011-08-21 17:03:01
lic5352
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3樓2011-08-22 08:29:45
sanbu830317
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【答案】應(yīng)助回帖
小酒窩7988(金幣+8): 2011-08-23 10:39:28
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摘自agilent官網(wǎng)，供參考。 伸舌峰（peak fronting）可能由多種情況引起。 最有可能導(dǎo)致伸舌峰（peak fronting）的情況是色譜柱過載。 在這種情況下，通常會(huì)發(fā)現(xiàn)峰保留時(shí)間稍稍縮短。 這也是最簡(jiǎn)單的檢查方法，因?yàn)橹灰⑸渖倭繕悠凡z查峰形就能發(fā)現(xiàn)問題。 但是至少還有其它四種原因?qū)е律焐喾澹╬eak fronting）。 這四種原因分別是色譜柱溝流、被分析物和硅之間的離子干擾、被分析物在流動(dòng)相中溶解性差以及流動(dòng)相和鍵合相之間的濕潤(rùn)性問題。 色譜柱溝流會(huì)導(dǎo)致所有的峰都變?yōu)樯焐喾澹╬eak fronting），或者至少讓色譜圖中最大的峰變成伸舌峰（peak fronting）（如果其它峰過于小的話）。 如果出現(xiàn)這種問題，需要更換色譜柱。 用一根新色譜柱來研究這個(gè)問題。 增加緩沖液離子強(qiáng)度或者改變流動(dòng)相的pH值，通常能改善引發(fā)伸舌峰（peak fronting）的離子相互作用。 增加離子強(qiáng)度能夠降低硅和離子被分析物之間的相互作用，而改變pH值能起到同樣的效果。需要評(píng)定溶解性，盡力提高被分析物的溶解性并評(píng)估最后的色譜圖。 例如，可以增加樣品的聲處理時(shí)間并把它重新注入或者讓它溶解在溶劑中（在該溶劑中樣品具有很好的溶解性），然后稀釋并注入流動(dòng)相。 此外，所有懷疑出現(xiàn)溶解性問題的樣品都應(yīng)進(jìn)行過濾。 還可以通過脫機(jī)方式混合樣品和流動(dòng)相，觀察在流動(dòng)相中是否明顯溶解。 濕潤(rùn)性是指流動(dòng)相完全滲透鍵合相的能力，在這種情況下，被分析物能與所有的鍵合相發(fā)生相互作用。 如果C18色譜柱結(jié)合使用高度水性的流動(dòng)相，可能不會(huì)到達(dá)完全的濕潤(rùn)性。 鍵合相會(huì)自己折疊起來。 結(jié)果就可能會(huì)丟失保留時(shí)間并導(dǎo)致峰變形。 如果可能的話，增加流動(dòng)相中的有機(jī)量并重新評(píng)估峰形。 否則，您可能需要考慮選擇專門為極高水性流動(dòng)相而設(shè)計(jì)的色譜柱。 這些是導(dǎo)致伸舌峰（peak fronting）的主要原因及其解決方法。 請(qǐng)注意，這些問題可能會(huì)導(dǎo)致峰拖尾，解決方法與伸舌峰（peak fronting）的解決方法相同。 |
4樓2011-08-22 12:13:19
徐春子2011
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5樓2012-03-22 19:36:59
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6樓2012-06-13 10:19:15
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7樓2012-12-01 13:25:25
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