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西風(fēng)的安逸銅蟲 (小有名氣)
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RNA提取方法 已有6人參與
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1. 取莖稈于液氮中快速研磨，直至白色粉末。用藥勺將粉末舀至裝有1毫升Trizol的EP管中，并迅速搖勻，看到溶液呈均勻的乳狀即可。 2. 4攝氏度、10000rpm離心2~5分鐘。 3 取上清，加入200微升氯仿，蓋好蓋，劇烈震蕩。 4. 4攝氏度、10000rpm離心4~6分鐘，RNA在上層睡相中。 5. 取上清，大概400微升（注意：不要吸到其他層），轉(zhuǎn)移到新的離心管中，加入等體積的異丙醇（400微升），搖勻。 6. 4攝氏度、10000rpm離心4~5分鐘即可。 7. 將上清倒掉，加入1毫升75%乙醇（750微升無水乙醇+250微升DEPC水）洗滌沉淀。 8. 4攝氏度、5000rpm離心2~3分鐘。 9. 倒掉上清，用移液槍將剩余的溶液吸干，注意不要吸到下面的沉淀（吸的時(shí)候保證沉淀在上）。 10. 室溫水平放置晾干。 11. 加30微升DEPC水溶解RNA，混勻。 |
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