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cib百里酚藍(lán)新蟲 (小有名氣)
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為什么不同PCR儀擴(kuò)增結(jié)果不同
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| 在下最近做PCR,擴(kuò)增某植物基因組的DNA，在國產(chǎn)儀器上擴(kuò)出條帶單一，產(chǎn)物量較少，同樣的條件在進(jìn)口儀器上卻擴(kuò)出很多非特異性條帶，陰性對(duì)照也有條帶，請(qǐng)高手指點(diǎn)一下該如何調(diào)一下條件 |
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空谷幽風(fēng)
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2樓2011-08-24 17:01:07
3樓2011-08-24 17:10:54
blackrose8089
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5樓2011-08-25 09:17:59
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6樓2011-08-25 10:48:34
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西瓜(金幣+4): Good 2011-08-25 17:26:12
西瓜(金幣+4): Good 2011-08-25 17:26:12
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1、不同的機(jī)子、甚至同一臺(tái)機(jī)子同樣的程序還有可能出現(xiàn)不一樣的結(jié)果； 2、擴(kuò)出的條帶比較淺可以做一個(gè)降落pcr，再用自己之前延伸的溫度擴(kuò)25個(gè)循環(huán)，這樣結(jié)果應(yīng)該會(huì)好點(diǎn)。也可以做梯度pcr摸索最佳延伸溫度； 3、LZ第二次擴(kuò)基因的時(shí)候陰性對(duì)照都有條帶了，有可能操作過程體系污染了。模板量加多了也會(huì)出現(xiàn)雜帶，或是條帶不清晰的情況 |
7樓2011-08-25 15:26:12
jb1003
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8樓2011-08-26 17:19:18
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