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請(qǐng)教高粱組培的問(wèn)題
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請(qǐng)問(wèn)，我要做高粱組培，據(jù)說(shuō)高粱成功率非常低，所以想請(qǐng)教幾個(gè)問(wèn)題： 1，用什么做外植體啊？莖尖和根尖都可以嗎？怎么放啊？可以用種子嗎？ 2，高粱的種子非常小，分不清哪個(gè)是胚，哪個(gè)是胚乳。如要要取胚，怎么取��？ 3，你們用的什么激素��？濃度是多少��？ 4，用什么抗生素好��？濃度呢？ 非常感謝各位��！非常感謝！比較急！請(qǐng)不吝賜教！ |
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2樓2011-08-25 14:03:17
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
amisking(金幣+2): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-08-25 19:27:03
amisking(APEPI+1): 授予一個(gè)epi 2011-08-25 19:27:17
cona(金幣+30): 雖然沒(méi)有說(shuō)到我想要的答案，但還是非常感謝你的幫助！謝謝了！ 2011-08-26 19:29:03
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cona(金幣+30): 雖然沒(méi)有說(shuō)到我想要的答案，但還是非常感謝你的幫助！謝謝了！ 2011-08-26 19:29:03
| 做高粱和玉米這種的一般常用的外植體都是幼胚，也有用根尖和芽尖、子葉節(jié)等做外植體的。這些查中文的CNKI都會(huì)有的。但是因?yàn)楦吡煌衩滓粯右彩蔷哂衅贩N差異的。所以培養(yǎng)基的配方也不盡相同，現(xiàn)在主流的就是用N6的大量，B5的微量，有機(jī)，組培誘導(dǎo)初始一般都用2,4-D，一般不超過(guò)2mg/L，但也有高的。另外還有用改良MS的，一堆英文文獻(xiàn)都有，但都不一定會(huì)重復(fù)出來(lái)，因?yàn)檫@些都是有保留的，而且有基因型差異地�？股刈铋_(kāi)始是不用的，除非你出愈傷后做侵染，才需要的，抗生素一般為你所轉(zhuǎn)質(zhì)粒上的即可，另外是農(nóng)桿菌的話要用除農(nóng)桿菌的抗生素。高粱如果要做組培選種子話你首先得把高粱套袋，然后授粉，授粉14-16天，就可以把高粱的種子取下來(lái)，這時(shí)殼較軟，幼胚也好取，一擠就出來(lái)。當(dāng)然都要在超凈臺(tái)內(nèi)操作。成熟胚也可以，就是現(xiàn)在的成熟的種子，但也得保證是純合的自交系。先用水泡再切，不過(guò)很難作。其他外植體的話，可以用種子發(fā)無(wú)菌苗，然后取苗上部位做組培。 |
3樓2011-08-25 14:40:26
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