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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 化學化工區(qū) » 分析 » 色譜質譜 » HPLC基線問題請教
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[求助]
HPLC基線問題請教
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小弟關于HPLC基線有些疑問，抓了3張屏，請大家看看，給點意見，非常感謝！ 儀器是varian prep star, 紫外檢測器，可以同時檢測190~900nm的吸收。 第一張圖片有很多鋸齒形狀的基線，這代表是氣泡嗎？還是什么別的原因？ 第二和第三張圖片是同一次run，沒有打樣品，分別是192nm和255nm的吸收。淋洗條件是60分鐘從50%乙腈/水升到100%乙腈，192nm的吸收特別的雜，但是在255nm基線還算平整。我查了下乙腈的UV cutoff 是190nm，是不是表示這些雜峰就不是乙腈了？這是不是代表這個柱子臟得不行了？我淋洗了好幾個小時都是這個樣子  非常感謝，金幣一定送上！  氣泡嗎？ 192nm吸收 255nm吸收 |
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wqs43
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2樓2012-01-14 13:41:22
3樓2012-01-14 13:55:14
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renchailp(金幣+2): thank you so much!!! 2012-01-15 02:44:05
renchailp(金幣+2): thank you so much!!! 2012-01-15 02:44:05
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第一張圖片 1、檢測器問題，譬如檢測池有氣泡、檢測池污染（卸下取出凸鏡等配件異丙醇超聲清洗）；譬如氘燈老化、光柵老化、電路板故障燈（自檢、工程師——更換配件） 2、電源電壓問題（使用穩(wěn)壓電源） 3、靜電干擾（檢查地線是否脫落） 4、流動相問題，有氣泡或者所用試劑雜質限度高。（超聲、更換、通過不跑流動相時考察基線狀態(tài)判斷） 5、色譜柱污染、管路污染（這種情況基線波動不會太過規(guī)律，估計不是） 第二和第三張圖片 背景吸收問題，200nm左右，背景吸收都很高，使用默克試劑，因雜質限度問題，背景吸收相對較小。 |
4樓2012-01-14 22:47:56
5樓2012-01-15 08:16:21
zz831024 
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renchailp6樓2012-01-15 16:55:12
7樓2012-01-16 02:00:05
8樓2012-01-16 11:24:53
解決的辦法是在檢測器流出管子上接一個塑料的東西提高壓力到40（我不確定是psi還是bar），這樣從檢測器流出的都沒有氣泡了基線非常平，happy ending 
9樓2012-01-20 10:07:27
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