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huazi5853

銀蟲 (初入文壇)

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[求助] 考馬斯亮藍(lán)法測(cè)蛋白含量時(shí)吸光度A595nm為負(fù)值�。�！求助

小弟用內(nèi)含4mol/L NaCl 的0.05M Tris-HCl 緩沖液去除豬皮中的非膠原蛋白，4℃條件下處理24h，取濾液，用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)濾液中蛋白含量，以蒸餾水為空白樣，測(cè)A595nm，結(jié)果發(fā)現(xiàn)待測(cè)液波長(zhǎng)是負(fù)值，很迷惑，求大俠指點(diǎn)，謝謝！！

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十年修得同船渡

1樓 2011-08-26 16:17:19

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

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【答案】應(yīng)助回帖

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amisking(金幣+2, BioEPI+1): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-08-28 13:06:04

引用回帖:

1樓: Originally posted by huazi5853 at 2011-08-26 16:17:19:
小弟用內(nèi)含4mol/L NaCl 的0.05M Tris-HCl 緩沖液去除豬皮中的非膠原蛋白，4℃條件下處理24h，取濾液，用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)濾液中蛋白含量，以蒸餾水為空白樣，測(cè)A595nm，結(jié)果發(fā)現(xiàn)待測(cè)液波長(zhǎng)是負(fù)值，很迷惑，求大俠指 ...

我用BCA法的，感覺線性范圍比較大，比考染大多了。圖中橫軸是BSA含量，微克，縱軸是OD562與空白對(duì)照的差值。

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回復(fù)此樓

流星來時(shí)我許了個(gè)愿，愿我有吃有喝還有舒服的豬圈。討厭發(fā)帖前不搜索論壇重復(fù)發(fā)帖和僅把論壇當(dāng)解決問題工具，久不看論壇一來就提問者，寧棄EPI和VIP也不回帖。

5樓2011-08-28 02:05:18

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