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考馬斯亮藍(lán)法測蛋白含量時(shí)吸光度A595nm為負(fù)值!!求助
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| 小弟用內(nèi)含4mol/L NaCl 的0.05M Tris-HCl 緩沖液去除豬皮中的非膠原蛋白,4℃條件下處理24h,取濾液,用考馬斯亮藍(lán)法測濾液中蛋白含量,以蒸餾水為空白樣,測A595nm,結(jié)果發(fā)現(xiàn)待測液波長是負(fù)值,很迷惑,求大俠指點(diǎn),謝謝! |
我的實(shí)驗(yàn) |

專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
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專家經(jīng)驗(yàn): +248 |

木蟲 (小有名氣)
圣斗士
| 為什么不用你的Tris溶液做空白呢 Tris會影響考馬斯亮藍(lán)的測試結(jié)果的 但影響不大 我之前也碰到這種情況 一開始是因?yàn)榭捡R斯亮藍(lán)放太久了,染色能力不行了,所以微量的蛋白濃度時(shí)檢測不到的,ABS也為負(fù),后來換了考馬斯亮藍(lán)結(jié)果好了很多,只要蛋白濃度不低于0.01mg/ml 就不會為負(fù)值 |

木蟲 (小有名氣)
圣斗士

木蟲 (小有名氣)
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