 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 945 | 回復(fù): 4 | ||||
| 本帖產(chǎn)生 1 個 MolEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | ||||
guoting329銀蟲 (小有名氣)
|
[求助]
連接轉(zhuǎn)化
|
|||
|
載體用的3300.片段大小1800bp,16°過夜連接，在卡那抗性的板上長出來了，但搖 菌怎么都搖不起來，搖菌用的是卡那抗性的LB液體培養(yǎng)基，難道板上長的全部都是假陽性嘛？是什么原因造成的呢？？哪位大俠能幫忙解釋下，謝謝�。�！ [ 來自科研家族 海外留學(xué) ] |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有193人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
anlewo7777
木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 5
- 應(yīng)助: 12 (小學(xué)生)
- 金幣: 1786.8
- 散金: 7
- 紅花: 3
- 帖子: 341
- 在線: 108.3小時
- 蟲號: 314883
- 注冊: 2007-02-25
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物
2樓2011-08-30 13:06:13
天使托
專家顧問 (職業(yè)作家)
T.Shen
-
專家經(jīng)驗(yàn): +57 - MolEPI: 106
- 應(yīng)助: 95 (初中生)
- 貴賓: 0.263
- 金幣: 16348.8
- 散金: 593
- 紅花: 74
- 沙發(fā): 9
- 帖子: 3652
- 在線: 289小時
- 蟲號: 441757
- 注冊: 2007-10-27
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
- 管轄: 微生物
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金幣+5, MolEPI+1): Good! 2011-08-30 15:27:44
guoting329(金幣+5): 很好 2011-08-30 16:52:17
西瓜(金幣+5, MolEPI+1): Good! 2011-08-30 15:27:44
guoting329(金幣+5): 很好 2011-08-30 16:52:17
|
1：你的載體上有無篩選標(biāo)記，比如說LacZ等，如果有的話可以借助篩選標(biāo)記完成你的克隆； 2：固體板子上長出來，在液體里要不出來原因可能： 2.1：液體LB一般比固體敏感一些，所以用Kan濃度應(yīng)該比固體稍微低一些，當(dāng)然了，你如果用相同濃度也可以，但是如果不長，并不一定是假陽性，有可能是液體中濃度過大導(dǎo)致長不起來，這時候就需要降低液體中的抗生素濃度； 2.2 ：假陽性 2.3：其實(shí)你可以挑取長出來的單克隆劃線在相同濃度的抗生素板子上，然后PCR，提取質(zhì)粒驗(yàn)證。。。當(dāng)然了你選擇菌液PCR也可以的； 3：你連接過程中有問題，當(dāng)然了從以下幾方面改進(jìn)： 3.1：載體和基因雙酶切是否完全？純化呢？ 3.2：載體和基因純化完之后，電泳定量，然后確定連接體系中載體和基因的添加量。。。有可能是你連接體系不太合適。 4：針對目前的情況，就是把板子上的單克隆劃線在相同濃度的板子上，然后PCR驗(yàn)證。。。然后提取質(zhì)粒酶切驗(yàn)證。。。 祝好運(yùn)。。。。  |
3樓2011-08-30 15:19:12
guoting329
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 196.9
- 散金: 152
- 紅花: 3
- 帖子: 62
- 在線: 55小時
- 蟲號: 1161070
- 注冊: 2010-12-02
- 專業(yè): 作物種質(zhì)資源與遺傳育種學(xué)
4樓2011-08-30 16:54:57
guoting329
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 196.9
- 散金: 152
- 紅花: 3
- 帖子: 62
- 在線: 55小時
- 蟲號: 1161070
- 注冊: 2010-12-02
- 專業(yè): 作物種質(zhì)資源與遺傳育種學(xué)
5樓2011-08-30 16:56:12
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 guoting329 的主題更新
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +4 | AZMK 2026-03-27 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +7 | 新時代材料 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
[考研] 352分 化工與材料 +3 | 海納百川Ly 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +4 | 舊吢 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工調(diào)劑 +10 | A-哆啦Z夢 2026-03-23 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 324求調(diào)劑 +5 | hanamiko 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 336材料求調(diào)劑 +7 | 陳瀅瑩 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +6 | wfh030413@ 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿華理，數(shù)一英一285求A區(qū)調(diào)劑 +8 | AZMK 2026-03-25 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +6 | wasdssaa 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 281求調(diào)劑 +3 | 亞克西good 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 309求調(diào)劑 +4 | gajsj 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿上海交大生物與醫(yī)藥專碩324分，求調(diào)劑 +6 | jiajunX 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考研] B區(qū)考研調(diào)劑 +4 | yqdszhdap－ 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 292求調(diào)劑 +4 | 鵝鵝鵝額額額額?/a> 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 269求調(diào)劑 +4 | 我想讀研11 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 315分，誠求調(diào)劑，材料與化工085600 +3 | 13756423260 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +6 | ytter 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求助 +5 | 夢里的無言 2026-03-21 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求 B區(qū) 調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-21 | 3/150 |
|