 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 7342 | 回復(fù): 15 | |||
| 本帖產(chǎn)生 1 個(gè) MolEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
friya0910新蟲 (正式寫手)
|
[求助]
IPTG誘導(dǎo)
|
||
| 有沒有不加IPTG誘導(dǎo)，也能表達(dá)目的蛋白的情況存在�。课业臎]加IPTG誘導(dǎo)培養(yǎng)5h的菌好像也表達(dá)我的目的蛋白了，怎么回事�。� |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有249人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
★
西瓜(金幣+1): 歡迎交流 2011-09-13 11:53:30
西瓜(金幣+1): 歡迎交流 2011-09-13 11:53:30
|
同問 我也一樣，1月前表達(dá)的，未加IPTG的無條帶，加入IPTG的有條帶，效果很好。 剛剛拿到誘導(dǎo)結(jié)果，發(fā)現(xiàn)未加IPTG的和加入的SDS-PAGE一樣，都有目的蛋白條帶。 總結(jié)了網(wǎng)上的說法： 1.IPTG殘留。其不被細(xì)菌代謝，而且我的接種量很大，200ul接種5ml。 2.本底表達(dá)。細(xì)菌產(chǎn)生了IPTG的類似物，就是半乳糖什么的，導(dǎo)致未加IPTG也表達(dá)。 3.菌濃度太高的時(shí)候加入了IPTG，可能由于第一條，這樣，細(xì)菌本身有本地表達(dá)，搖的時(shí)間很長的時(shí)候，本底表達(dá)高，而在OD值高的時(shí)候加入IPTG后，表達(dá)量會(huì)降低，所以在SDS-PAGE上顯示差不多 |
9樓2011-09-13 10:40:49
天使托
專家顧問 (職業(yè)作家)
T.Shen
-
專家經(jīng)驗(yàn): +57 - MolEPI: 106
- 應(yīng)助: 95 (初中生)
- 貴賓: 0.263
- 金幣: 16332.8
- 散金: 593
- 紅花: 74
- 沙發(fā): 9
- 帖子: 3652
- 在線: 289小時(shí)
- 蟲號: 441757
- 注冊: 2007-10-27
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
- 管轄: 微生物
3樓2011-09-01 19:20:46
xbl3688
銀蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 12 (小學(xué)生)
- 金幣: 1240.1
- 紅花: 1
- 帖子: 311
- 在線: 104.7小時(shí)
- 蟲號: 1348397
- 注冊: 2011-07-17
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
friya0910(金幣+1): 2011-09-01 19:31:00
dhd997(金幣+3): good 2011-09-02 07:00:33
friya0910(金幣+1): 2011-09-01 19:31:00
dhd997(金幣+3): good 2011-09-02 07:00:33
|
1、在沒有IPTG誘導(dǎo)劑存在的情況下，細(xì)菌本身當(dāng)然還是會(huì)表達(dá)自身蛋白的，但是量比較低； 2、IPTG是β–半乳糖苷酶的活性誘導(dǎo)物質(zhì)，在它的誘導(dǎo)下乳糖被催化形成半乳糖，使lac操縱子處于激活狀態(tài)，從而大量的轉(zhuǎn)錄表達(dá)目的基因； 3、IPTG對細(xì)菌有一定的毒害作用，一般使用濃度為1mM/ml. |
4樓2011-09-01 19:28:13
friya0910
新蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 19.4
- 散金: 360
- 帖子: 401
- 在線: 77.4小時(shí)
- 蟲號: 1073675
- 注冊: 2010-08-12
- 專業(yè): 作物分子育種
|
http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=3538745 上面有我跑的全菌蛋白的圖，麻煩您幫我看看，這圖能說明我的蛋白表達(dá)了嗎？這圖沒跑未加IPTG的菌培養(yǎng)5h的情況，我今天跑的上清和沉淀，發(fā)現(xiàn)未加IPTG的菌培養(yǎng)5h后上清中都有我的目的蛋白，于是我就困惑了……等脫完色把圖傳上來讓您幫我看看，成嗎？ |
5樓2011-09-01 19:30:36
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 263求調(diào)劑 +4 | yqdszhdap－ 2026-03-22 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +6 | 冬十三 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 298求調(diào)劑一志愿211 +3 | 上岸6666@ 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 354求調(diào)劑 +7 | Tyoumou 2026-03-18 | 10/500 |
|
|
[考博] 招收博士1-2人 +3 | QGZDSYS 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工306 +4 | z1z2z3879 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 286分人工智能專業(yè)請求調(diào)劑愿意跨考！ +4 | lemonzzn 2026-03-17 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +3 | 呼呼？~+123456 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)297求調(diào)劑 +3 | Daisy☆ 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +3 | 勇敢的小吳 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 316求調(diào)劑 +6 | 梁茜雯 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 機(jī)械專碩299求調(diào)劑至材料 +3 | kkcoco25 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +10 | yy要上岸呀 2026-03-17 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 二本跨考鄭大材料306英一數(shù)二 +3 | z1z2z3879 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +6 | 曼殊2266 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +3 | 阿姐阿姐家啊 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 08工學(xué)調(diào)劑 +5 | 用戶573181 2026-03-20 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 招收調(diào)劑碩士 +4 | lidianxing 2026-03-19 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 288求調(diào)劑，一志愿華南理工大學(xué)071005 +5 | ioodiiij 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 本科鄭州大學(xué)物理學(xué)院，一志愿華科070200學(xué)碩，346求調(diào)劑 +4 | 我不是一根蔥 2026-03-18 | 4/200 |
|