 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2682 | 回復: 8 | ||||
| 本帖產(chǎn)生 1 個 MolEPI ，點擊這里進行查看 | ||||
[求助]
如何將miRNA構建到慢病毒載體
|
||||
| 如何將miRNA構建到慢病毒載體？以前只做過將基因構建到質粒載體，兩者有什么區(qū)別？最好有具體的實驗步驟，或相關資料，不勝感激！ |
回復此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 實用的資源 | 【分子生物】EPI帖 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
wanpeng» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有121人回復
-
蛋白質檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
» 本主題相關價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 震撼！植物可以通過MiRNA調控動物（zz 南方周末）
已經(jīng)有50人回復
- 復雜疾病關聯(lián)的miRNA-mRNA功能模塊識別的信息融合方法研究
已經(jīng)有8人回復
- 世界級美女科學家Nature文章解析miRNA----ebio
已經(jīng)有19人回復
- miRNA質粒轉染
已經(jīng)有7人回復
- 【分享】連接miRNA到胚胎干細胞的核心轉錄調控環(huán)
已經(jīng)有4人回復
- 【資源】miRNA-96在胰腺癌中可作為一種腫瘤抑制基因抑制KRAS
已經(jīng)有4人回復
cdl007
木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 41
- 應助: 46 (小學生)
- 貴賓: 0.025
- 金幣: 2570.6
- 紅花: 11
- 帖子: 545
- 在線: 123.1小時
- 蟲號: 275133
- 注冊: 2006-08-27
- 專業(yè): 腫瘤病因
【答案】應助回帖
★ ★ ★
西瓜(金幣+3, MolEPI+1): Good 2011-09-04 18:56:06
tutufei(金幣+5): 多謝 2011-09-08 16:21:30
西瓜(金幣+3, MolEPI+1): Good 2011-09-04 18:56:06
tutufei(金幣+5): 多謝 2011-09-08 16:21:30
|
一個說明書上的內(nèi)容，相當簡單好理解 慢病毒包裝簡要程序(以六孔板中的1孔為例)： 第一天： 1.用無抗生素DMEM+10%FBS鋪板293FT細胞，2ml/孔。確保第二天細胞密度達到80%-90%融合度 第二天： 1.轉染293FT細胞。 1. 500ul Opti-MEM稀釋2ug pWPXLd-目的基因+1.5ug psPAX2+1.5ug pMD2.G 2. 500ul Opti-MEM稀釋15ul lipofectamine2000 3. 5min后，將，溶液混合，室溫靜止30min 4. 從6孔板中吸出1ml培養(yǎng)基，然后滴加入1ml質粒和脂質體混合物。 2. 6-10h后，移除含有DNA-脂質體復合物的培養(yǎng)基，代之以正常培養(yǎng)液DMED+ 10%FBS（從此刻開始算時間）。 第三天： 3.轉染24h后，熒光顯微鏡下觀察，轉染效率應達到70%以上 第四天： 4. 48h收獲含病毒的上清，0.45um濾膜過濾， 同時再往6孔板中加入2ml完全培養(yǎng)基 4. 感染細胞：用一份病毒液+2份完全培養(yǎng)基感染目的細胞。 第五天： 5. 72h后再次收獲病毒上清。將昨天感染的細胞離心去除上清，然后再次感染目的細胞。 6. 一般感染48h后，就能見到明顯的熒光。 |
2樓2011-09-04 18:41:16
cdl007
木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 41
- 應助: 46 (小學生)
- 貴賓: 0.025
- 金幣: 2570.6
- 紅花: 11
- 帖子: 545
- 在線: 123.1小時
- 蟲號: 275133
- 注冊: 2006-08-27
- 專業(yè): 腫瘤病因
【答案】應助回帖
★ ★
dhd997(金幣+2): 專家就是專家 2011-09-09 07:46:49
dhd997(金幣+2): 專家就是專家 2011-09-09 07:46:49
|
http://www.stemcell8.cn/forum-viewthread-tid-41159-highlight.html 這個網(wǎng)址上的更詳細，，俺倒是想做，可惜實驗室條件不夠。。。。。 |
3樓2011-09-04 18:59:41
l-c-l
金蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 1
- 應助: 58 (初中生)
- 金幣: 2434.4
- 紅花: 10
- 帖子: 773
- 在線: 130.8小時
- 蟲號: 1311363
- 注冊: 2011-05-31
- 性別: GG
- 專業(yè): 腫瘤免疫
4樓2011-09-07 15:46:55
5樓2011-09-08 14:44:54
l-c-l
金蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 1
- 應助: 58 (初中生)
- 金幣: 2434.4
- 紅花: 10
- 帖子: 773
- 在線: 130.8小時
- 蟲號: 1311363
- 注冊: 2011-05-31
- 性別: GG
- 專業(yè): 腫瘤免疫
6樓2011-09-09 07:35:28
7樓2012-02-21 15:28:23
8樓2012-09-07 10:05:18
jinanfendou
鐵蟲 (初入文壇)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 19
- 帖子: 15
- 在線: 8.8小時
- 蟲號: 2064805
- 注冊: 2012-10-16
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物遺傳育種學
9樓2012-11-06 14:04:10
相關版塊跳轉
我要訂閱樓主 tutufei 的主題更新
| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 268求調劑 +6 | 簡單點0 2026-03-17 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料專碩306英一數(shù)二 +9 | z1z2z3879 2026-03-16 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 334求調劑 +3 | 志存高遠意在機?/a> 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 296求調劑 +5 | 大口吃飯 身體健 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 293求調劑 +6 | 世界首富 2026-03-11 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 274求調劑0856材料化工 +13 | z2839474511 2026-03-11 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 求調劑，總分315，考的生物醫(yī)藥，一志愿湖南師范大學。調劑到任何專業(yè)都可以 +4 | 小丁想進步 2026-03-11 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 271求調劑 +12 | 生如夏花… 2026-03-11 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 285化工學碩求調劑（081700） +9 | 柴郡貓_ 2026-03-12 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿，福州大學材料專碩339分求調劑 +3 | 木子momo青爭 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[基金申請]
今年的國基金是打分制嗎？
 50+3
|
zhanghaozhu 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 304求調劑 +5 | 素年祭語 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 318求調劑 +3 | Yanyali 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工求調劑一志愿 985 總分 295 +8 | dream…… 2026-03-12 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 315求調劑 +9 | 小羊小羊_ 2026-03-11 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 材料專碩350 求調劑 +4 | 王金科 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 工科278分求調劑 +5 | 周慢熱啊 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 土木第一志愿276求調劑，科研和技能十分豐富，求新興方向的導師收留 +3 | 土木小天才 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 化工學碩306求調劑 +9 | 42838695 2026-03-12 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 321求調劑（食品/專碩） +3 | xc321 2026-03-12 | 6/300 |
|