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niuniu2010

銅蟲(chóng) (初入文壇)

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[求助] 設(shè)計(jì)的引物錯(cuò)了一個(gè)堿基對(duì)后續(xù)試驗(yàn)影響大嗎？

如題，設(shè)計(jì)的引物錯(cuò)了一個(gè)堿基，用它所擴(kuò)增出的目的片段有問(wèn)題嗎？

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1樓 2011-09-05 16:44:50

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love_st

金蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

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引用回帖:

2樓: Originally posted by 瓶?jī)夯?/i> at 2011-09-05 16:49:21:
你如果是用作表達(dá)的話，你查一下這個(gè)堿基編碼的蛋白跟原始的有沒(méi)有差異，會(huì)不會(huì)有影響就可以了。如果單單是克隆序列的話，研究基因功能一般是沒(méi)多大影響的，除非你的堿基跟相鄰堿基變成終止密碼子了。
另外，如 ...

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3樓2011-09-05 16:55:41

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瓶?jī)夯?/font>

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wanhscn(金幣+1): 有時(shí)做標(biāo)記時(shí)，為了照顧酶切位點(diǎn)，只能在引物上選錯(cuò)配。 2011-09-05 17:00:25

你如果是用作表達(dá)的話，你查一下這個(gè)堿基編碼的蛋白跟原始的有沒(méi)有差異，會(huì)不會(huì)有影響就可以了。如果單單是克隆序列的話，研究基因功能一般是沒(méi)多大影響的，除非你的堿基跟相鄰堿基變成終止密碼子了。
另外，如果是在5‘端，影響不大。有的時(shí)候引物設(shè)計(jì)酶切位點(diǎn)就是要把堿基換掉的呀！

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2樓2011-09-05 16:49:21

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dhd997(金幣+2): 鼓勵(lì)交流 2011-09-05 18:38:47
niuniu2010(金幣+2): 2011-09-06 08:31:37

不知道樓主克隆這個(gè)基因是用來(lái)做什么，如果是用于表達(dá)蛋白，就需要看看會(huì)不會(huì)產(chǎn)生移碼突變，如果單單是克隆一個(gè)基因，那影響應(yīng)該不大

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我不管你看起看不起我，我都是個(gè)演員

4樓2011-09-05 17:52:37

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我目的是為了表達(dá)蛋白用的，如果不產(chǎn)生移碼突變是不是問(wèn)題就不大呀？

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5樓2011-09-06 08:42:24

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