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lovejesus銀蟲 (小有名氣)
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[交流]
目的基因?qū)氲绞荏w細(xì)胞會發(fā)生基因重組嗎?說說原因! 已有4人參與
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| 請教 如題 謝謝各位了 |
銀蟲 (小有名氣)
榮譽(yù)版主 (文壇精英)
合伙創(chuàng)業(yè)版兼職版主
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可以重組到基因組,現(xiàn)在最常用的有2種方法 1,同源重組,這就是knockout最常用的方法,比如red重組系統(tǒng),這需要你在構(gòu)建載體的時候用PCR等方法得到和目的區(qū)域相同的片段,在重組酶的幫助下,把你的目的片段特異的整合到你想要的地方,達(dá)到敲除或敲入的目的 2,隨機(jī)整合,這是轉(zhuǎn)染常用的方法,普通質(zhì)粒會有一定的概率隨機(jī)插入到你的基因組,位置未知,概率很低,一般需要一個標(biāo)記基因做篩選,比如g418,嘌呤霉素等等,這個是不受質(zhì)粒序列影響的,成功率低,所以篩選很困難 |
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