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xiaoqiang100鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
ELISA測抗體效價(jià)的準(zhǔn)確性問題
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| 我用ELISA夾心法測抗體效價(jià)，底物是蛋白，一抗是我們要測的抗體，二抗是山羊抗兔的HRP標(biāo)記的，顯色物為OPD。但是我感覺，OPD反應(yīng)的時(shí)間越長，OPD顯色就越深，O.D值就越高，這樣我們用軟件分析得出的抗體的效價(jià)就不一樣。打個(gè)比方說：前面所有的條件完全相同，在顯色這一步，我有的顯色5分鐘，有的顯色10分鐘。因?yàn)轱@色10分鐘的O.D值比五分鐘大，那么我算出來的同一種抗體的效價(jià)就會不同。這個(gè)問題該如何解決呢？另外，我們的抗體還沒有商業(yè)化抗體，所以無法利用現(xiàn)有的商業(yè)抗體進(jìn)行校準(zhǔn)。 |
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xiaoqiang100
鐵蟲 (小有名氣)
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3樓2011-09-09 09:11:58
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2樓2011-09-08 22:55:58
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