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紅色日歷木蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
這是我跑的PCR電泳圖，求高手指點(diǎn)！
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第一道是marker，后面的是跑的梯度，但是條帶都不是很明顯，一片一片的。我的目的片段是257bp，求高手給指點(diǎn)迷津。 我跑的三十個(gè)循環(huán)，一個(gè)師姐說(shuō)增加循環(huán)數(shù)看看能不能好點(diǎn)，但是另一個(gè)師姐說(shuō)要降低循環(huán)數(shù)，否則面積更大。。。。  嗚嗚，我剛剛開(kāi)始做，什么都不懂，到底該聽(tīng)誰(shuí)的��？有沒(méi)有哪位高手指點(diǎn)一下怎樣分析電泳圖結(jié)果，優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件��？不勝感激�。�！ [ Last edited by 紅色日歷 on 2011-9-16 at 11:13 ] |
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2樓2011-09-16 11:22:01
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【答案】應(yīng)助回帖
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紅色日歷(金幣+6): 又重新開(kāi)始做的RT，等待實(shí)驗(yàn)結(jié)果中，謝謝指點(diǎn)！ 2011-09-19 11:49:01
adslye(金幣+2): 鼓勵(lì)交流~祝順利！ 2011-09-25 09:20:15
紅色日歷(金幣+2): 2011-11-18 23:09:23
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紅色日歷(金幣+2): 2011-11-18 23:09:23
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1.如果條帶正確，這個(gè)亮度也可以分析啦，適當(dāng)加大循環(huán)次數(shù)也可以，但不能到平臺(tái)期； 2.條帶跑得有點(diǎn)彌散，應(yīng)該跟電泳條件有關(guān)，改進(jìn)電泳條件應(yīng)該可以改進(jìn)； 3.這張圖最大的問(wèn)題是有兩條帶，應(yīng)考慮樣品或者試劑是否有污染，比如基因組污染。 |
10樓2011-09-17 13:41:50
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