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葉風(fēng)and花影

銀蟲(chóng) (小有名氣)

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[交流] 膠體金抗原

制備膠體金試紙條，所用的抗原必須要是當(dāng)初免疫小鼠時(shí)用的抗原么，如果不一樣會(huì)有多大差別啊。比如免疫抗原連接的是BSA，制備膠體金用連接OVA的可以么，連接OVA的是我用來(lái)做ELISA的。

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1樓 2011-09-21 15:00:04

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凌波麗

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4548162樓: Originally posted by 葉風(fēng)and花影 at 2012-04-29 15:29:45:
ELISA檢測(cè)時(shí)ok的，就是溶解性很差，做膠體金試紙條時(shí)就很麻煩啊，總覺(jué)得連上那個(gè)大極性BSA后怎么溶解性還這么差呢，可是免疫小鼠都是沒(méi)問(wèn)題的，求指教啊，thx

你可以減低溶液的極性試試看能不能增加抗原溶解性，可以往溶液中加入蔗糖或甘油，不要超過(guò)1.5mol/L。
溶解性主要是由分子表面的極性基團(tuán)決定的，你的半抗原分子鏈接上BSA，必然在其分子表面，原來(lái)的疏水的半抗原是在BSA已經(jīng)折疊完畢之后連接上其分子表面的，一般不會(huì)引起B(yǎng)SA折疊狀態(tài)的改變，所以疏水的半抗原分子還是裸露在極性的水環(huán)境中，因此溶解性不高。

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9樓2012-04-29 18:19:40

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1254085935

木蟲(chóng) (小有名氣)

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葉風(fēng)and花影(金幣+1): 謝謝參與

我在做，卻得不出結(jié)果

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3樓2012-04-12 20:48:19

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fondbelief

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葉風(fēng)and花影(金幣+1): 謝謝參與

免疫抗原連接BSA，也可以做ELISA，為什么非得換成偶聯(lián)OVA呢？

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4樓2012-04-25 16:59:22

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凌波麗

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葉風(fēng)and花影(金幣+1): 謝謝參與

因?yàn)槟銢](méi)有說(shuō)具體情況，不過(guò)我可以提醒你：同樣的半抗原與不同的連接蛋白質(zhì)形成的完全抗原的免疫反應(yīng)性不是有半抗原唯一決定的，這方面有不少SCI文獻(xiàn)。完全抗原的免疫反應(yīng)性是半抗原與其連接蛋白共同決定的。
至于膠體金標(biāo)記，你愿意討論以后再說(shuō)。

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5樓2012-04-25 23:44:16

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