 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 4262 | 回復(fù): 17 | |||
| 本帖產(chǎn)生 1 個(gè) BioEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
[交流]
求助：純化蛋白遇到包涵體了，尿素怎么用？
|
|||
|
純化大腸桿菌重組蛋白，遇到包涵體了，超聲裂解不能澄清，離心后蛋白全在菌體沉淀里面 低溫誘導(dǎo)貌似沒什么效果。。。。。。請問大家用什么方法釋放出來包涵體呢？ 有人用8M尿素處理超聲成功破裂包涵體 我的問題是，8M的尿素怎么去掉呢？我們的蛋白是GST標(biāo)簽的，是打算用GST瓊脂糖柱子純化的。。。。我不知道8M的尿素對柱子有沒有什么影響呢？ |
回復(fù)此樓» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
花生剝了殼» 猜你喜歡
一志愿北京化工大學(xué)070300 學(xué)碩336求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
一志愿東華大學(xué)化學(xué)070300，求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
318求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
求調(diào)劑一志愿海大，0703化學(xué)學(xué)碩304分，有大創(chuàng)項(xiàng)目，四級已過
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
一志愿武理材料工程348求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
275求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
招08考數(shù)學(xué)
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
303求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
306求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 蛋白包涵體透析后雜蛋白很多，請教原因
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 包涵體洗滌后8M尿素不溶解
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助】包涵體表達(dá)與可溶性表達(dá)
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】急！如何分離未徹底破碎的細(xì)胞及包涵體？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于millpore超濾離心管
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】如何制備干凈的包涵體
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】原核表達(dá)蛋白純化
已經(jīng)有29人回復(fù)
» 搶金幣啦！回帖就可以得到:
-
2026年國基求好運(yùn)！
+5/245
-
濟(jì)南大學(xué)林秀娟教授招收材料類博士生
+1/83
-
天津理工大學(xué)國家杰青王鐵課題組招收2026年博士研究生
+1/82
-
浙江大學(xué)侯陽教授團(tuán)隊(duì)誠聘博士后---高性能固態(tài)電解質(zhì)與固態(tài)電池器件設(shè)計(jì)
+1/81
-
青島高校 研究生招生
+1/47
-
天津城建大學(xué)招收物理、化學(xué)或者生物調(diào)劑生一名，前往天津大學(xué)聯(lián)合培養(yǎng)
+1/37
-
吲哚美辛原料藥合成交流
+1/35
-
中國科學(xué)院杭州醫(yī)學(xué)研究所覃江江課題組招聘博士后
+1/30
-
春眠不覺曉
+1/25
-
同濟(jì)大學(xué)環(huán)境學(xué)院 肖倩特聘研究員課題組 招聘碩士/博士（長期有效）
+1/20
-
招聘科研助理——儲(chǔ)能方向（儲(chǔ)能、流體傳熱、CFD模擬）
+1/16
-
雙一流天津工業(yè)大學(xué)電信學(xué)院李鴻強(qiáng)教授招收2026年申請審核制博士
+1/13
-
新加坡國立大學(xué)藥學(xué)系化學(xué)生物學(xué)課題組招PhD
+1/10
-
shu湘潭大學(xué)化工學(xué)院招收化工、能源動(dòng)力、工程熱物理相關(guān)研究生調(diào)劑
+1/9
-
天津工業(yè)大學(xué)雙一流高校招博士、碩士、博士后
+1/8
-
香港大學(xué)David Srolovitz教授課題組招聘「香江學(xué)者」博士后
+1/5
-
南京林業(yè)大學(xué)化學(xué)工程學(xué)院柏惺峰課題組招收2026年申請考核制博士2名
+1/4
-
香港中文大學(xué)化學(xué)系吳基培教授招募2026年秋季（2026年8月1日）入學(xué)全獎(jiǎng)博士研究生
+1/3
-
湖北省屬一流高校-國家杰青 招07/08/10生物相關(guān)專業(yè)
+1/1
-
211/雙一流石河子大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院--電催化，CO2捕集和轉(zhuǎn)化
+1/1
18樓2022-08-05 00:19:55
18853850850
金蟲 (正式寫手)
- BioEPI: 1
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 1283.4
- 帖子: 301
- 在線: 116.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 1189069
btx362237729(金幣+3): 非常感謝 2011-10-04 13:36:46
amisking(BioEPI+1): 鼓勵(lì)應(yīng)助。 2011-10-04 18:51:24
amisking(BioEPI+1): 鼓勵(lì)應(yīng)助。 2011-10-04 18:51:24
|
上柱之前先進(jìn)行包涵體的復(fù)性 （1）將溶解的包涵體裝入已經(jīng)處理好的透析袋中，封好口，。 （2）放于4℃復(fù)性緩沖液中進(jìn)行梯度復(fù)性，間隔時(shí)間為10-12h，復(fù)性緩沖液的濃度分別為：4.5mmol/L、3.5mmol/L、2.5mmol/L、1.5mmol/L、0.5mmol/L、0mmol/L。 （3）取出復(fù)性后的蛋白溶液12000rpm離心20min，取上清，分別取少量的上清和少許的沉淀進(jìn)行SDS-PAGE，檢測復(fù)性情況。 復(fù)性緩沖液：PBS 1mmol/LEDTA +尿素 |
2樓2011-10-04 13:16:47
18853850850
金蟲 (正式寫手)
- BioEPI: 1
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 1283.4
- 帖子: 301
- 在線: 116.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 1189069
3樓2011-10-04 13:17:59
★ ★ ★ ★
amisking(金幣+4): 鼓勵(lì)應(yīng)助。 2011-10-04 18:51:31
amisking(金幣+4): 鼓勵(lì)應(yīng)助。 2011-10-04 18:51:31
|
復(fù)性緩沖液的濃度分別為：4.5mmol/L、3.5mmol/L、2.5mmol/L、1.5mmol/L、0.5mmol/L、0mmol/L。 復(fù)性緩沖液：PBS 1mmol/LEDTA +尿素 抱歉這個(gè)濃度沒看懂呢，是指的尿素的濃度嗎？ 聽說尿素處理后GST標(biāo)簽蛋白的結(jié)構(gòu)被破壞得很嚴(yán)重，復(fù)性效果也不好，不知道是不是真的？ 復(fù)性就指去除尿素，然后蛋白質(zhì)自己折疊？導(dǎo)師說我們這個(gè)蛋白就是個(gè)直的，不需要折疊，那么主要就要復(fù)性GST了 |
4樓2011-10-04 13:30:32
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +4 | 來好運(yùn)來來來 2026-03-21 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 初試 317 +7 | 半拉月丙 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 廣西大學(xué)材料導(dǎo)師推薦 +3 | 夏夏夏小正 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿深大，0703化學(xué)，總分302，求調(diào)劑 +4 | 七月-七七 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
[考研] 求助 +5 | 夢里的無言 2026-03-21 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 298求調(diào)劑 +4 | 上岸6666@ 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 279分求調(diào)劑 一志愿211 +14 | chaojifeixia 2026-03-19 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +3 | Jack?k?y 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +9 | 梁梁校校 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿西南交大，求調(diào)劑 +5 | 材化逐夢人 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿 西北大學(xué) ，070300化學(xué)學(xué)碩，總分287，雙非一本，求調(diào)劑。 +4 | 晨昏線與星海 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 中南大學(xué)化學(xué)學(xué)碩337求調(diào)劑 +3 | niko- 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿西南交通 專碩 材料355 本科雙非 求調(diào)劑 +5 | 西南交通專材355 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 353求調(diào)劑 +3 | 拉鉤不許變 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 261求B區(qū)調(diào)劑，科研經(jīng)歷豐富 +3 | 牛奶很忙 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 086500 325 求調(diào)劑 +3 | 領(lǐng)帶小熊 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +5 | pupcoco 2026-03-17 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 085601專碩，總分342求調(diào)劑，地區(qū)不限 +5 | share_joy 2026-03-16 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +11 | zjl的號(hào) 2026-03-16 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 有沒有道鐵/土木的想調(diào)劑南林，給自己招師弟中～ +3 | TqlXswl 2026-03-16 | 7/350 |
|