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wangdandelia木蟲 (正式寫手)
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[求助]
切膠回收 已有5人參與
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請問各位前輩,切膠純化的時(shí)候,用promega柱子回收需要哪些注意事項(xiàng)呢? 我們回收PCR產(chǎn)物,都是按照說明書操作的,可是回收率特別低,120ug的PCR產(chǎn)物回收后才得到2.5ug。謝謝咯! |
木蟲 (正式寫手)
木蟲 (正式寫手)
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1,binding 和膠完全混合后掛柱子時(shí)候多重復(fù)兩次,而且轉(zhuǎn)速不宜太快,5000rpm足夠了,再高就不大好了 2、75%乙醇洗滌完了注意要開蓋空轉(zhuǎn),蒸發(fā)乙醇 3、洗脫的時(shí)候加雙蒸水或elution buffer后在37℃放幾分鐘之后再離心洗脫 最后一步洗脫的時(shí)候多重復(fù)兩次洗脫,每次用洗脫下的雙蒸水或者elution buffer再重新加到柱子里重復(fù)洗脫 |

鐵桿木蟲 (正式寫手)

木蟲 (正式寫手)

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