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[求助]
基因敲除細(xì)胞陽(yáng)性純和子篩選
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| 本人現(xiàn)在想做了基因敲除的細(xì)胞，想了想我的載體上除了熒光沒有其他篩選標(biāo)記也沒有抗藥性 。想分出陽(yáng)性細(xì)胞可是我所知道的只有用96孔板來稀釋 ，這是很笨的方法不知各位高手有沒有好的方法。另外敲除的細(xì)胞很大可能是雜合子 等位基因還能表達(dá) ，我只想得到純和子 不知各位有什么好的辦法 謝謝 |
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【答案】應(yīng)助回帖
清風(fēng)寨(金幣+2): 謝謝 我做的是細(xì)胞 我后面要檢測(cè)酶活 DNA 還有RNA的 覺的拿到純合子比較好講故事 2011-10-09 21:10:41
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1.你敲除的是什么細(xì)胞？動(dòng)物？植物？真菌？還是細(xì)菌？如果是后兩個(gè)不大需要考慮是否純合子的問題，植物的么，笨方法就是不斷的自交，拿到純合子，動(dòng)物細(xì)胞沒做過，不了解， 2、不過我覺得你可以試一下用流式細(xì)胞術(shù)加細(xì)胞分揀，這方面的文獻(xiàn)應(yīng)該有不少，就是基于熒光進(jìn)行細(xì)胞分揀的， |
2樓2011-10-09 21:01:28
asznpb
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8樓2011-10-11 10:02:35
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