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誰(shuí)給我講一下SDS-PAGE濃縮膠的作用
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SDS-PAGE中濃縮膠具體原理是什么�。磕奈煌o我講講~ |
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 【分子生物】EPI帖 | 蛋白質(zhì)生物學(xué) |
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laokuang1988
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2樓2011-10-13 21:12:59
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【答案】應(yīng)助回帖
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皇馬鐵衛(wèi)(金幣+3): 謝謝 2011-10-13 21:48:18
wanhscn(金幣+2): Good！ 2011-10-14 00:16:21
西瓜(金幣+3, MolEPI+1): Good! 2011-11-02 01:52:40
皇馬鐵衛(wèi)(金幣+3): 謝謝 2011-10-13 21:48:18
wanhscn(金幣+2): Good！ 2011-10-14 00:16:21
西瓜(金幣+3, MolEPI+1): Good! 2011-11-02 01:52:40
| 大致是以下情況：濃縮膠是pH6.7，分離膠pH8.9；電泳緩沖液使用的Tris-甘氨酸緩沖系統(tǒng)。在濃縮膠中，其pH環(huán)境呈弱酸性，因此甘氨酸解離很少，其在電場(chǎng)的作用下，泳動(dòng)效率低；而CL離子卻很高，兩者之間形成導(dǎo)電性較低的區(qū)帶，蛋白分子就介于二者之間泳動(dòng)。由于導(dǎo)電性與電場(chǎng)強(qiáng)度成反比，這一區(qū)帶便形成了較高的電壓遞度，壓著蛋白質(zhì)分子聚集到一起，濃縮為一狹窄的區(qū)帶。當(dāng)樣品進(jìn)入分離膠后，由于膠中pH的增加，呈堿性，甘氨酸大量解離，泳動(dòng)速率增加，直接緊隨氯離子之后，同時(shí)由于分離膠孔徑的縮小，在電場(chǎng)的作用下，蛋白分子根據(jù)其固有的帶電性和分子大小進(jìn)行分離。 |
3樓2011-10-13 21:19:33
4樓2011-10-13 21:56:15
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5樓2011-10-13 23:15:26
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6樓2011-10-14 09:59:34
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7樓2011-10-14 21:39:38
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