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誰給我講一下SDS-PAGE濃縮膠的作用
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SDS-PAGE中濃縮膠具體原理是什么?哪位童鞋給我講講~ |
【分子生物】EPI帖 | 蛋白質(zhì)生物學(xué) |

木蟲 (著名寫手)
銅蟲 (小有名氣)
木蟲 (著名寫手)
| 大致是以下情況:濃縮膠是pH6.7,分離膠pH8.9;電泳緩沖液使用的Tris-甘氨酸緩沖系統(tǒng)。在濃縮膠中,其pH環(huán)境呈弱酸性,因此甘氨酸解離很少,其在電場的作用下,泳動效率低;而CL離子卻很高,兩者之間形成導(dǎo)電性較低的區(qū)帶,蛋白分子就介于二者之間泳動。由于導(dǎo)電性與電場強度成反比,這一區(qū)帶便形成了較高的電壓遞度,壓著蛋白質(zhì)分子聚集到一起,濃縮為一狹窄的區(qū)帶。當樣品進入分離膠后,由于膠中pH的增加,呈堿性,甘氨酸大量解離,泳動速率增加,直接緊隨氯離子之后,同時由于分離膠孔徑的縮小,在電場的作用下,蛋白分子根據(jù)其固有的帶電性和分子大小進行分離。 |

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