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ayuan7165木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
掃描探針顯微鏡與掃描電子顯微鏡
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實(shí)驗(yàn)室擁有的掃描電子顯微鏡不是特別好，最大放大倍數(shù)只有30000倍；我希望看到的藻細(xì)胞表面的形貌還不是特別清楚。另外實(shí)驗(yàn)室還有個(gè)掃描探針顯微鏡，放大倍數(shù)將遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)SEM，不知道這個(gè)可以用來(lái)看藻細(xì)胞表面形貌嗎？藻細(xì)胞需要做什么前處理？冷凍干燥嗎？ 還望高手相助�。�！  |
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quiller2000
木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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2樓2011-10-17 23:25:30
michaelcyq
鐵桿木蟲(chóng) (小有名氣)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★
zhang8826857(金幣+4): good，看lz的反饋，確實(shí)幫到lz的話(huà)可以向版主申請(qǐng)EPI啊，呵呵，加油 2011-10-18 08:33:39
ayuan7165(金幣+15): 多謝多謝�。〈蛄诉@么多字O(∩_∩)O~我也都試試干燥和不干燥的吧，再次多謝高手！ 2011-10-18 08:36:31
zhang8826857(金幣+4): good，看lz的反饋，確實(shí)幫到lz的話(huà)可以向版主申請(qǐng)EPI啊，呵呵，加油 2011-10-18 08:33:39
ayuan7165(金幣+15): 多謝多謝�。〈蛄诉@么多字O(∩_∩)O~我也都試試干燥和不干燥的吧，再次多謝高手！ 2011-10-18 08:36:31
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SPM理論上可以看到原子，但是一般SPM的可能比較困難，我們實(shí)驗(yàn)室的AFM分辨率能到0.1nm，但是一般的實(shí)驗(yàn)用不到這么極端的條件，呵呵。不過(guò)看細(xì)菌的鞭毛菌毛等超微結(jié)構(gòu)就足夠用了，相信看藻類(lèi)更是綽綽有余。測(cè)定時(shí)一般不需要任何前處理，甚至在液體中可以直接測(cè)量。同時(shí)和EM比，AFM出來(lái)的圖像是真3D的。 我在液體中測(cè)過(guò)細(xì)菌形態(tài)，不過(guò)需要細(xì)胞自己黏附或者預(yù)先固定在較平的介質(zhì)上。我也測(cè)過(guò)干燥過(guò)后的細(xì)胞，但是細(xì)胞失水和液體中測(cè)得形貌差異較大。 AFM還需要注意選擇合適的探針及掃描模式。對(duì)于細(xì)胞這種很軟的實(shí)驗(yàn)對(duì)象，推薦使用tapping mode。這種模式下探針對(duì)于細(xì)胞表面作用力相對(duì)較小，且無(wú)側(cè)向力刮擦樣品，出來(lái)圖像較為清晰，且有phase image可以供分析。但是tapping mode測(cè)定時(shí)間較長(zhǎng)，不太利于觀察細(xì)胞分裂等短時(shí)間變化。也有一些研究用contact mode來(lái)觀測(cè)細(xì)胞，優(yōu)點(diǎn)就是速度快。缺點(diǎn)很多：需要用spring constant非常小的探針(也就是很軟)，容易刮擦樣品，且無(wú)法獲得phase image等。 |
3樓2011-10-18 00:31:13
quiller2000
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4樓2011-10-18 09:18:59
songweiling
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5樓2011-11-10 17:19:41
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