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ayuan7165木蟲 (正式寫手)
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[求助]
掃描探針顯微鏡與掃描電子顯微鏡
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實驗室擁有的掃描電子顯微鏡不是特別好,最大放大倍數(shù)只有30000倍;我希望看到的藻細(xì)胞表面的形貌還不是特別清楚。另外實驗室還有個掃描探針顯微鏡,放大倍數(shù)將遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過SEM,不知道這個可以用來看藻細(xì)胞表面形貌嗎?藻細(xì)胞需要做什么前處理?冷凍干燥嗎? 還望高手相助。! |
鐵桿木蟲 (小有名氣)
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SPM理論上可以看到原子,但是一般SPM的可能比較困難,我們實驗室的AFM分辨率能到0.1nm,但是一般的實驗用不到這么極端的條件,呵呵。不過看細(xì)菌的鞭毛菌毛等超微結(jié)構(gòu)就足夠用了,相信看藻類更是綽綽有余。測定時一般不需要任何前處理,甚至在液體中可以直接測量。同時和EM比,AFM出來的圖像是真3D的。 我在液體中測過細(xì)菌形態(tài),不過需要細(xì)胞自己黏附或者預(yù)先固定在較平的介質(zhì)上。我也測過干燥過后的細(xì)胞,但是細(xì)胞失水和液體中測得形貌差異較大。 AFM還需要注意選擇合適的探針及掃描模式。對于細(xì)胞這種很軟的實驗對象,推薦使用tapping mode。這種模式下探針對于細(xì)胞表面作用力相對較小,且無側(cè)向力刮擦樣品,出來圖像較為清晰,且有phase image可以供分析。但是tapping mode測定時間較長,不太利于觀察細(xì)胞分裂等短時間變化。也有一些研究用contact mode來觀測細(xì)胞,優(yōu)點(diǎn)就是速度快。缺點(diǎn)很多:需要用spring constant非常小的探針(也就是很軟),容易刮擦樣品,且無法獲得phase image等。 |
木蟲 (著名寫手)

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