wu2008yao

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wu2008yao(金幣+1): 我要發(fā)酵液而非菌種，不過(guò)謝謝了！ 2011-10-21 09:39:19
scelab(金幣+5): 辛苦總結(jié)了，不過(guò)確實(shí)不是。lz所問(wèn)。要不你單獨(dú)把此內(nèi)容開(kāi)貼，呵呵 2011-10-21 11:36:49

這是我總結(jié)了好多人的觀點(diǎn)，也有我自己的觀點(diǎn)，你看看吧，應(yīng)該對(duì)你有用處。或者你把你的菌先平板畫線分離，然后進(jìn)行保藏，效果肯定非常的好。^_^還有好幾篇關(guān)于菌種保藏的資料，看看吧^_^
如果用50%甘油生理鹽水可保存更長(zhǎng)時(shí)間。
如果有條件的話，菌種最好保存在－70，30－50％甘油可以保存半年左右。另外，如果是表達(dá)基因重組蛋白那就多提點(diǎn)質(zhì)粒吧，質(zhì)粒很容易保存，菌種不行了及時(shí)轉(zhuǎn)化，反正也不麻煩。
本人的菌種負(fù)７０度保存了N年一點(diǎn)問(wèn)題都沒(méi)有。負(fù)２０度冰柜也問(wèn)題不大。最怕的是那種有冷凍冷藏的冰箱，兩三個(gè)月肯定基本完完。我們實(shí)驗(yàn)室的都保存了一兩年都?jí)褖训�，進(jìn)甘油管前的菌濃度要濃縮一點(diǎn)。我實(shí)驗(yàn)室的保存3年也沒(méi)有問(wèn)題，我認(rèn)為主要是你的冰箱溫度不夠低，一般用30~50%的甘油在-30℃以下的冰箱可以保存幾年。-20℃的冰箱肯定保存不了多久.
不要反復(fù)凍融！
穩(wěn)定的低溫對(duì)甘油保存是很重要的。
其實(shí)，如果果真要長(zhǎng)期保存菌種，最好就是凍干保存。
如果短期保存，做穿刺管幾個(gè)月是沒(méi)有問(wèn)題的，4度保存就可以，制作和保存都很方便。
終濃度15%左右的甘油管-20保存三四個(gè)月問(wèn)題不大，半年就不太好了
甘油的濃度在20-50%這個(gè)范圍就可以，但關(guān)鍵是溫度最好是在-70℃以下，其保存時(shí)間至少在1年以上。要長(zhǎng)期保存的話，凍干保存是最理想的了。
我們用的甘油的濃度在20%，保存在－80℃的冰箱里，可以長(zhǎng)期保存。注意在保存時(shí)菌液和甘油要混溶。
用滅菌的濾紙片涂上大腸桿菌，放進(jìn)滅菌的一次性塑料尖咀離心管（1.5ml）內(nèi)，置普通冰箱的冷凍室冷凍保存，此種保存方法可將菌種保存至少一年半以上，不妨試一試。
最好的辦法就是把它進(jìn)行凍干,可以保存數(shù)年不減毒力,我的大腸桿菌凍干保存了七年還好著呢.
最好的辦法就是把它進(jìn)行凍干,可以保存數(shù)年不減毒力,我的大腸桿菌凍干保存了七年還好著呢.
我用20%甘油肉湯，在-80 保存多年，且反復(fù)動(dòng)融，至今長(zhǎng)的很好
20%-50%的濃度是不是高了點(diǎn)��？實(shí)驗(yàn)室的某些質(zhì)粒感覺(jué)用25%的甘油保存，放幾個(gè)月就OVER了��？
用甘油保存于－70度，取出接種時(shí)，不要等它完全凍融，部分凍融后立即接種，剩下部分立即再置回冰箱中，這可避免反復(fù)凍融帶來(lái)的對(duì)細(xì)菌的破壞。

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7樓2011-10-21 08:37:23

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shine372

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wu2008yao(金幣+1): 2011-11-14 09:00:11

過(guò)0.22um的膜抽濾下 -20保存就木有問(wèn)題了

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8樓2011-10-22 10:43:00

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