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[求助]
測(cè)序結(jié)果怪異
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從基因組中擴(kuò)增出一片段，回收連接T載體，轉(zhuǎn)化菌株，單克隆搖菌拿去測(cè)序，測(cè)序成功，得到單一的測(cè)序結(jié)果；隨后從T載體上擴(kuò)增目的片段，結(jié)果跑膠卻得到多條位置非常接近的片段（相差幾十bp），因?yàn)槟康幕蛴卸鄠�(gè)同源性很高的基因（長(zhǎng)度相差幾十bp，在5‘和3’同源性都高達(dá)99%），所以同一引物擴(kuò)增出多個(gè)相近片段是可能性很大的，但為什么第一次pcr后跑膠只有一條帶，而且測(cè)序也只測(cè)到一條DNA呢？麻煩高手解答，謝謝！ 第一次菌落PCR結(jié)果 第二次從T載體上擴(kuò)增目的片段 第一次從基因組上擴(kuò)增目的片段 |
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csh973
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zc10052157
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2樓2011-10-22 20:51:11
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4樓2011-10-23 08:37:30
heroyl
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5樓2011-10-23 14:12:52
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