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wanhscn木蟲 (職業(yè)作家)
哲學(xué)@草根
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[交流]
應(yīng)助蟲友 real-gold 的關(guān)于 瓊脂糖 6倍loading buffer 已有3人參與
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你好，向你請(qǐng)教一個(gè)自制marker的問題，酶切好之后，一般marker里是要加入含溴酚藍(lán)之類的指示劑或助沉劑，在論壇上看到你是加入loading buffer和EDTA，想問一下你加入的loading buffer和EDTA的比例是怎樣的？謝謝 10xNEB （10L） Tris 1201g；EDTA 33.6g；NaAc 102.5g；HAc 275-350ml 至PH=8.1 6xLoading B （100ml） Glycerol 70ml；10xNEB 5ml；0.25M EDTA 8ml；ddH2O 10ml；20%SDS 1ml；1% Bromphenol Blue 6ml （less BPB when for a darker color） EDTA final cons 20mM 其它蟲友可補(bǔ)充其他方法！ [ Last edited by wanhscn on 2011-10-24 at 16:27 ] |
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2樓2011-10-24 16:50:01
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3樓2011-10-24 17:09:30
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小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
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小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
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敢問以上配方有出處否？ 請(qǐng)教最終是加入該6Xloading buffer使loading buffer終濃度為1X吧？ 再請(qǐng)教大家marker的有效期、穩(wěn)定性主要是受自身片段的性質(zhì)還是受保存的buffer影響大一點(diǎn)？發(fā)現(xiàn)國內(nèi)的一些產(chǎn)家的marker降解的很快，而國外的產(chǎn)品不怎么容易降解，放在室溫4-5個(gè)月好好的。 [ Last edited by real-gold on 2011-10-24 at 21:01 ] |
4樓2011-10-24 20:49:39
wanhscn
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5樓2011-10-24 20:52:08
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6樓2011-10-25 10:36:31
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wanhscn(金幣+2): 新蟲可以多發(fā)帖參與交流，不建議用表情符號(hào)，但是對(duì)于新蟲還是鼓勵(lì)下！ 2011-10-25 21:03:46
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7樓2011-10-25 19:56:28
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