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wanhscn木蟲 (職業(yè)作家)
哲學(xué)@草根
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[交流]
應(yīng)助蟲友 real-gold 的關(guān)于 瓊脂糖 6倍loading buffer 已有3人參與
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你好,向你請(qǐng)教一個(gè)自制marker的問題,酶切好之后,一般marker里是要加入含溴酚藍(lán)之類的指示劑或助沉劑,在論壇上看到你是加入loading buffer和EDTA,想問一下你加入的loading buffer和EDTA的比例是怎樣的?謝謝 10xNEB (10L) Tris 1201g;EDTA 33.6g;NaAc 102.5g;HAc 275-350ml 至PH=8.1 6xLoading B (100ml) Glycerol 70ml;10xNEB 5ml;0.25M EDTA 8ml;ddH2O 10ml;20%SDS 1ml;1% Bromphenol Blue 6ml (less BPB when for a darker color) EDTA final cons 20mM 其它蟲友可補(bǔ)充其他方法! [ Last edited by wanhscn on 2011-10-24 at 16:27 ] |

送鮮花一朵 |
敢問以上配方有出處否? 請(qǐng)教最終是加入該6Xloading buffer使loading buffer終濃度為1X吧? 再請(qǐng)教大家marker的有效期、穩(wěn)定性主要是受自身片段的性質(zhì)還是受保存的buffer影響大一點(diǎn)?發(fā)現(xiàn)國(guó)內(nèi)的一些產(chǎn)家的marker降解的很快,而國(guó)外的產(chǎn)品不怎么容易降解,放在室溫4-5個(gè)月好好的。 [ Last edited by real-gold on 2011-10-24 at 21:01 ] |
新蟲 (小有名氣)
木蟲 (職業(yè)作家)
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