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[求助]
破碎細胞的各種方法
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| 本人欲測定胞內代謝的有機酸，但是由于能力所限，找不到相關的文獻和資料參考，主要需要破碎細胞的各類詳細方法，望各位蟲友指教。 |
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錯了，是胞內有機酸 
2樓2011-11-01 17:38:09
yang0071
木蟲 (職業(yè)作家)
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3樓2011-11-01 17:51:14
4樓2011-11-01 20:16:11
【答案】應助回帖
光2012(金幣+5): 2011-11-03 09:59:39
| 我破碎細胞用的是溶菌酶和超聲波細胞破碎儀結合使用的方法破碎菌體。溶菌酶的添加量為0.1 g/100 mL菌懸液，待溶菌酶完全溶解后，置于35℃搖床培養(yǎng)箱160 r/min 破除細胞壁2 h。然后，使用超聲波細胞破碎儀輔助破碎菌體，其工作參數(shù)為：功率600 w，超聲時間5 min，工作2 s，間歇2 s，同時菌懸液要冰浴，以免溫度過高，影響酶的活性。采用革蘭氏染色法檢測菌體是否破碎。這要看你是什么菌體啦，要是真核細胞，應該更好破碎的！最近看的一篇英文文獻，是菌懸液凍融后，等體積TEA緩沖液稀釋，在4度下用French pressure cell 下破碎的，壓力位60MPa。多找找應該可以找到的，實在找不到直接相關的步驟，就用別人的一些方法，嘗試看看用在自己試驗中驗證下可不可行。 |
5樓2011-11-02 11:00:35
linyingjia
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7樓2011-11-03 17:09:14
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8樓2011-11-04 17:48:12
光2012(金幣+3): 2011-11-09 16:41:08
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本帖內容被屏蔽 |
9樓2011-11-09 13:01:56
程xz777
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10樓2019-09-01 20:51:42
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