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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » co-ip求救
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lcdshanshi鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
co-ip求救 已有1人參與
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小弟現(xiàn)在在做co-ip實驗，但是重復了n遍都得不到結果，如圖所示，我用得是santa cruz的proteinA/G ,做的IP條帶很特異也很亮，但是co-ip的條帶就非常模糊，而且在可能出現(xiàn)的地方有拖帶，每次都是這樣，只有一次出現(xiàn)陽性結果，然后再也重復不出來了，簡要步驟如下： 1. cells were lysed withNP40 lysis buffer (Beyotime) 2. precleared with 20 ul protein A/G agarose beads(1:10) coupled with mouse IgG for 2 h.Centrifugation at 2500rpm and transfer 300ul supernatant for co-ip, 100ul for NC. 3. Afer incubate with antibody and protein A/G,The beads were washed thrice with 1ml PBS 各位大神幫我看看，到底是咋回事應該怎樣改動。謝謝。 |
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lcdshanshi
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2樓2011-11-03 08:15:20
lcdshanshi
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3樓2011-11-04 12:54:58
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4樓2011-11-04 14:12:47
5樓2018-05-04 09:32:31
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