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happyxiaoli銅蟲 (小有名氣)
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大鼠氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)方法 已有1人參與
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我最近做大鼠氣管上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)，用酶消化法，用了好幾種沒消化，得到的細(xì)胞數(shù)都特別少。 我的方法是：取大鼠2只，麻醉后，在無菌條件下取氣管，用冷的PBS液沖洗，分離除去其他粘膜組織，再用PBS（含青-鏈雙抗）液沖洗3遍，結(jié)扎一端，灌入0.25%胰酶，結(jié)扎另一端，4度，冰箱過夜。剪開結(jié)扎線，加入10%的小牛血清的DMEM培養(yǎng)液終止消化。將液體轉(zhuǎn)移置于10ml離心管中，1000r/min,10min.培養(yǎng)液沖洗重復(fù)一次，加培養(yǎng)液吹達(dá)成細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)，發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞的數(shù)量特別少。做了好幾次都是一樣的結(jié)果，我還試了0.25%中性蛋白酶，結(jié)果差不多。 現(xiàn)在找不出原因，請(qǐng)師哥師姐，朋友們幫幫忙，幫我分析一下，非常感謝！��！急！急！急！ |
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3樓2011-11-10 13:45:24
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4樓2011-11-10 13:50:13
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