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zhoujg88木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
求助一些酶緩沖液pH
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| 我做的是一些生物分子的吸附,比如溶菌酶、糜蛋白酶、胰蛋白酶、牛血清白蛋白等分子,可是配制緩沖液不知道的該怎么配,因?yàn)槲乙谌芤褐形?4小時(shí)還能保持其分子結(jié)構(gòu),然后測(cè)定吸附前后的紫外吸光度,溶液pH不對(duì)的話這些酶應(yīng)該就會(huì)不穩(wěn)定失活了,這可怎么辦呢? |
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
木蟲(chóng) (小有名氣)
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依據(jù)緩沖液對(duì)酶活性的影響可將緩沖液分為活性緩沖液、惰性緩沖液和抑制緩沖液三大類。緩沖液的離子強(qiáng)度也影響著酶的活性,一般選擇與生理環(huán)境或體液比較接近的離子強(qiáng)度。 理想的緩沖液應(yīng)具備以下條件: 。1)有足夠的緩沖容量:緩沖液的pKa與最適pH越接近,緩沖容量越大。有酸堿的產(chǎn)生或消耗的酶促反應(yīng),對(duì)緩沖容量的要求更高。 。2)純度高,不含有抑制酶活性的雜質(zhì)。 。3)溫度依賴性小,受溫度波動(dòng)pH變化小。 (4)盡量選擇活性緩沖液或惰性緩沖液。 。5)對(duì)酶有穩(wěn)定作用。 pH最好和在生理?xiàng)l件下一致?梢蕴砑右恍┍Wo(hù)劑。 |
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