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zhoujg88木蟲 (正式寫手)
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[求助]
求助一些酶緩沖液pH
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| 我做的是一些生物分子的吸附，比如溶菌酶、糜蛋白酶、胰蛋白酶、牛血清白蛋白等分子，可是配制緩沖液不知道的該怎么配，因?yàn)槲乙谌芤褐形?4小時(shí)還能保持其分子結(jié)構(gòu)，然后測(cè)定吸附前后的紫外吸光度，溶液pH不對(duì)的話這些酶應(yīng)該就會(huì)不穩(wěn)定失活了，這可怎么辦呢？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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zhoujg88(金幣+5): 謝謝�。〔贿^最適pH下酶不是不穩(wěn)定嗎？比如說(shuō)胰蛋白酶在pH2-3穩(wěn)定，最適pH卻是在8左右怎么辦呢？？ 2011-11-15 16:01:05
silicare(金幣+5, BioEPI+1): 2011-11-15 16:40:50
zhoujg88(金幣+5): 謝謝�。〔贿^最適pH下酶不是不穩(wěn)定嗎？比如說(shuō)胰蛋白酶在pH2-3穩(wěn)定，最適pH卻是在8左右怎么辦呢？？ 2011-11-15 16:01:05
silicare(金幣+5, BioEPI+1): 2011-11-15 16:40:50
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依據(jù)緩沖液對(duì)酶活性的影響可將緩沖液分為活性緩沖液、惰性緩沖液和抑制緩沖液三大類。緩沖液的離子強(qiáng)度也影響著酶的活性，一般選擇與生理環(huán)境或體液比較接近的離子強(qiáng)度。 理想的緩沖液應(yīng)具備以下條件： �。�1）有足夠的緩沖容量：緩沖液的pKa與最適pH越接近，緩沖容量越大。有酸堿的產(chǎn)生或消耗的酶促反應(yīng)，對(duì)緩沖容量的要求更高。 �。�2）純度高，不含有抑制酶活性的雜質(zhì)。 �。�3）溫度依賴性小，受溫度波動(dòng)pH變化小。 （4）盡量選擇活性緩沖液或惰性緩沖液。 �。�5）對(duì)酶有穩(wěn)定作用。 pH最好和在生理?xiàng)l件下一致。可以添加一些保護(hù)劑。 |
3樓2011-11-15 15:49:17
zhoujg88
木蟲 (正式寫手)
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2樓2011-11-15 15:46:40
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