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yesucao木蟲 (正式寫手)
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[求助]
綠色熒光蛋白的觀察與表達 已有1人參與
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最近一直在做綠色熒光蛋白的觀察與表達,用的載體是大腸桿菌-蘇云金穿梭載體,已經(jīng)加入了一個強啟動子和GFP,電轉化至野生的枯草芽孢桿菌和消除了內(nèi)生質粒的蘇云金芽孢桿菌中,已經(jīng)驗證構建的質粒轉進去了 目前的實驗結果: 1、用熒光顯微鏡觀察不到任何的熒光; 2、將搖了20h的菌液離心收集菌體,超聲波破碎,取上清跑SDS-PAGE,結果顯示:在30KDa左右消除內(nèi)生質粒的蘇云金芽孢桿菌有兩條帶,而未轉化GFP的蘇云金芽孢桿菌只有一條帶(與其中一條帶平行),轉了和沒轉的枯草芽孢桿菌則都沒有 這樣的結果到底GFP表達了沒有呢???說明說明問題?? |
至尊木蟲 (文壇精英)
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