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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 藥學 » 藥物分析 » 正相柱與反相柱的洗脫順序
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[求助]
正相柱與反相柱的洗脫順序
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因基礎知識不扎實，對正相柱與反相柱的洗脫順序十分不解，求高手指教。。 使用時為了能夠讓組分依次洗脫出來，梯度洗脫流動相的極性是應該怎么變化，水和有機相的比例應該是怎么變化，原理是什么呀？ 真希望各位大哥大姐能夠幫幫我，謝謝，真的謝謝。 [ 來自科研家族 藥物制劑 ] [ Last edited by TLC菜鳥 on 2011-11-15 at 21:32 ] |
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癡夷子皮
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3樓2011-11-15 22:41:32
wanggch123
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2樓2011-11-15 22:32:24
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【答案】應助回帖
★
novus(金幣+1): 謝謝交流！ 2011-11-16 21:19:50
TLC菜鳥(金幣+5): 為什么反相柱的洗脫順序極性大的先出來呢？是什么原理呀 2011-11-18 18:49:47
novus(金幣+1): 謝謝交流！ 2011-11-16 21:19:50
TLC菜鳥(金幣+5): 為什么反相柱的洗脫順序極性大的先出來呢？是什么原理呀 2011-11-18 18:49:47
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1. 正相柱洗脫的時候組分是按照極性從小到大的順序洗脫下來的，洗脫劑（如甲醇、乙腈、正己烷等）極性從小到大，常用填料為硅膠等； 反相柱洗脫的時候組分是按照極性從大到小的順序洗脫的，洗脫劑（如甲醇-水）性從大到小選擇，常用的填料有ODS等。 2. 差速遷移機制，分配色譜（分配系數）、吸附色譜（物理吸附）、離子交換色譜（離子交換）、空間排阻色譜（分子大�。└饔胁煌�。 |
4樓2011-11-16 11:36:26
【答案】應助回帖
★
jiangchunyong(金幣+1): 謝謝 2011-11-20 10:53:06
jiangchunyong(金幣+1): 謝謝 2011-11-20 10:53:06
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正相系統(tǒng)換反相系統(tǒng)注意事項 在液相色譜儀使用過程中，我們經常遇到液相色譜儀用戶正反相色譜系統(tǒng)互相現象，但由于使用操作不當，常常不注意間損壞了色譜柱，同時加重了液相色譜系統(tǒng)的污染，導致分析工作出現麻煩，現在將置換工作的基本流程列出，供用戶參考： 1. 首先用正己烷(硅膠柱)將色譜系統(tǒng)包括正相柱平衡好(保證20分鐘內基線平直,無峰出現)； 2. 卸掉硅膠柱，封好保存； 3. 將進樣閥與檢測器短路，用異丙醇沖洗色譜系統(tǒng)10分鐘(流速1ml/min).在這期間空撥進樣閥三次； 4.換甲醇(或已睛)沖洗系統(tǒng)20分鐘(流速2ml/min) ，此期間空撥進樣閥三次； 5. 安上反相色譜柱， 流速調到1ml/min,用甲醇(或已睛)沖洗系統(tǒng)，直到系統(tǒng)平衡； 6.進三針標準品,檢驗面積 ﹑保留時間是否重復,若不重復,繼續(xù)沖洗直到重復。 反相系統(tǒng)換正相系統(tǒng)的注意事項 反相系統(tǒng)換正相系統(tǒng)的注意事項 1.首先用甲醇(或已腈)將色譜系統(tǒng)包括反相柱平衡好(保證20分鐘內基線平直,無峰出現)； 2.卸掉反相柱，封好保存； 3.將進樣閥與檢測器短路,用異丙醇沖洗色譜系統(tǒng)10分鐘(流速1ml/min)，在這期間空撥進樣閥三次； 4.換正己烷(硅膠柱)沖洗系統(tǒng)20分鐘(流速2ml/min) ， 此期間空撥進樣閥三次； 5.安上硅膠色譜柱， 流速調到1ml/min,用正己烷沖洗系統(tǒng)，直到系統(tǒng)平衡； 6.進三針標準品檢驗面積﹑保留時間是否重復,若不重復,繼續(xù)沖洗直到重復。 |
5樓2011-11-19 22:38:14
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