 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 3231 | 回復(fù): 14 | |||
長(zhǎng)白山的夢(mèng)銀蟲 (小有名氣)
|
[求助]
請(qǐng)教用過(guò)反相硅膠柱分離的高手
|
||
|
我這個(gè)東西是正丁醇部分提取的東西，之前他們用大孔砍斷效果不好，到我這的時(shí)候就上LH-20試了下，效果不錯(cuò)，但是那個(gè)上樣量太少了160g填料一次上樣不到2g，現(xiàn)在老師讓我換用反相，所以想請(qǐng)教哈有過(guò)使用經(jīng)驗(yàn)的同仁們。 1.實(shí)驗(yàn)室的填料都是前兩屆的師兄師姐用過(guò)的裝在一些小柱子里的，有幾根都已經(jīng)干了，這個(gè)會(huì)不會(huì)影響使用，怎么處理？而且，還有點(diǎn)臟，用甲醇反復(fù)洗嗎？ 2.填料和上樣量的比大概是多少，我這個(gè)有個(gè)麻煩的是填料都濕的了，質(zhì)量還不好計(jì)算。如果這樣可不可以按柱體積來(lái) 3.樣品上樣如何選擇是濕法還是干法上樣 有點(diǎn)羅嗦有點(diǎn)雜，謝謝大家了 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 一些網(wǎng)址 |
» 猜你喜歡
311求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
304求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
354求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
321求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
274求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
281求調(diào)劑（0805）
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
085600材料與化工調(diào)劑 324分
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
能源材料化學(xué)課題組招收碩士研究生8-10名
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
267一志愿南京工業(yè)大學(xué)0817化工求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
328求調(diào)劑，英語(yǔ)六級(jí)551，有科研經(jīng)歷
已經(jīng)有10人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 正丁醇部分上反相硅膠柱條件摸索
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 反相硅膠硅膠怎樣清洗
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 求助：反相硅膠
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助】ODS反相硅膠柱分離苯乙醇苷類物質(zhì)怎么分��？
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助】求助反相硅膠柱上樣前樣品預(yù)處理
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助】準(zhǔn)備用反相硅膠柱層析分離純化，之前用HPLC怎么摸條件��？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助】反相硅膠分離純化皂甙的方法
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助】在什么情況下使用反相硅膠柱子
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 【請(qǐng)教】哪位蟲友用過(guò)C18的反相硅膠板，如何反復(fù)使用？(求助結(jié)束，望返還金幣)
已經(jīng)有9人回復(fù)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
長(zhǎng)白山的夢(mèng): 金幣+3, ★★★很有幫助, 很是受用 2012-06-24 09:46:42
長(zhǎng)白山的夢(mèng): 金幣+3, ★★★很有幫助, 很是受用 2012-06-24 09:46:42
|
買填料的技術(shù)老師告訴我 1. 一般情況下的常規(guī)清洗可以使用100%甲醇，100%丙酮。 2. 長(zhǎng)時(shí)間柱內(nèi)正常有機(jī)物污染，可用75%丙酮：25%異丙醇，或100%異丙醇。 3. 頑固有機(jī)污染物污染時(shí)可以使用100%乙酸乙酯，100%正己烷。4.使用正己烷或乙酸乙酯前要用異丙醇沖洗柱子保持溶劑相溶。 5.一般情況下要沖洗10個(gè)以上的柱體積，沖洗過(guò)程中要注意柱子的壓力，壓力過(guò)高時(shí)降低流速進(jìn)行清洗。 還有可以用 tris 洗，但是具體濃度什么的我忘了，我試過(guò)tris和丙酮，感覺(jué)作用不大。其實(shí)有點(diǎn)污染也沒(méi)事，你要是實(shí)在怕污染你的樣品的話可以梯度洗幾個(gè)體積，然后把液體旋干 看看有沒(méi)有質(zhì)量。。。我看到網(wǎng)上有人這么做。。。 乙腈我挺少用的。只是在做液相的時(shí)候用，看你這么一說(shuō)感覺(jué)你比我愛(ài)惜自己多多了。哈哈~ 談不上請(qǐng)教啦，都是互相交流下，想當(dāng)初我剛做的時(shí)候也好多不懂，現(xiàn)在也是。。都是在不斷的學(xué)習(xí)吧 |
10樓2012-06-21 20:18:48
rose.no.9
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 10 (幼兒園)
- 金幣: 8533.2
- 散金: 803
- 紅花: 2
- 帖子: 1046
- 在線: 168.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 830157
- 注冊(cè): 2009-08-18
- 專業(yè): 天然有機(jī)化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
長(zhǎng)白山的夢(mèng): 金幣+3, ★★★很有幫助 2012-06-21 09:47:43
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
長(zhǎng)白山的夢(mèng): 金幣+3, ★★★很有幫助 2012-06-21 09:47:43
| 干的反相可以用甲醇或丙酮重生，倒在燒杯里泡一兩個(gè)小時(shí)再重新裝柱，不會(huì)影響效果；臟反相可以用丙酮洗，可以把很多吸附的色素洗下來(lái)，然后用甲醇沖洗。填料和上樣的比例很大，具體沒(méi)有計(jì)算過(guò)。因?yàn)榉聪嘁话闶菑暮枯^高的甲醇水開始洗脫（當(dāng)然也有其他洗脫體系如丙酮乙腈，我們常用這個(gè)），樣品如果不溶于洗脫的初始體系，最好用拌樣的方法，干法上樣。 |
2樓2012-06-20 16:45:41
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
長(zhǎng)白山的夢(mèng): 金幣+2, ★有幫助 2012-06-21 09:48:01
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
長(zhǎng)白山的夢(mèng): 金幣+2, ★有幫助 2012-06-21 09:48:01
|
反相硅膠也叫ODS，用甲醇裝柱子，用甲醇-水做洗脫劑，開始用低濟(jì)度的甲醇，慢慢加大甲醇的量，最后用甲醇沖柱子，用甲醇保存就可以了 還可以用：1，推薦你使用HPLC試試。也是選用反向硅膠柱，流動(dòng)相為乙腈-水或者是甲醇-水。這樣的分離效果和分離效率肯定比你自己裝柱子要高很多倍！而且你的樣品是黃酮類的天然產(chǎn)物，那么它的或是它這一類的化合物的HPLC分離條件文獻(xiàn)中可定有大量記載，你也有參考依據(jù)了！自己裝的反相硅膠柱酯適合于分離極性差別明顯的兩種或三種等樣品的分離，如果要分離物的種類很多的話，是沒(méi)有明顯效果。 2， 推薦你使用正相硅膠柱層析方法試試。原理和反向類似，只是出峰順序相反。個(gè)人覺(jué)得對(duì)你這種要分離的天然產(chǎn)物，正相硅膠柱層析較反向更有優(yōu)勢(shì)。而且天然產(chǎn)物的這種分離條件文獻(xiàn)中也要大量記載，你可以在參考的基礎(chǔ)上進(jìn)行優(yōu)化。 1關(guān)于你說(shuō)的反相硅膠柱用的應(yīng)該不是中壓色譜系統(tǒng)而是就用了個(gè)泵在跑，那么就沒(méi)有紫外檢測(cè)，可以選擇跑柱同時(shí)點(diǎn)板檢測(cè)，所以先判斷你樣品有沒(méi)有顏色，如果有，在有顏色時(shí)接的瓶多一些。 2關(guān)于洗脫劑和梯度建議參考文獻(xiàn) 3上樣量一般比較純的話上樣量不大于 0.5g/120g 填料 |
3樓2012-06-20 17:13:26
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
長(zhǎng)白山的夢(mèng): 金幣+12, ★★★★★最佳答案, 謝謝 2012-06-21 09:47:21
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
長(zhǎng)白山的夢(mèng): 金幣+12, ★★★★★最佳答案, 謝謝 2012-06-21 09:47:21
|
1.實(shí)驗(yàn)室的填料都是前兩屆的師兄師姐用過(guò)的裝在一些小柱子里的，有幾根都已經(jīng)干了，這個(gè)會(huì)不會(huì)影響使用，怎么處理？而且，還有點(diǎn)臟，用甲醇反復(fù)洗嗎？ 臟的把柱頭挖了吧！！挖出來(lái)的用來(lái)拌樣挺好。干了的多用甲醇沖沖。。也可以梯度沖，說(shuō)不定能把臟東西沖出來(lái)，但是梯度不要跨太大。 2.填料和上樣量的比大概是多少，我這個(gè)有個(gè)麻煩的是填料都濕的了，質(zhì)量還不好計(jì)算。如果這樣可不可以按柱體積來(lái) 我25g ods最多上過(guò)600~800mg吧 3.樣品上樣如何選擇是濕法還是干法上樣 能用初始流動(dòng)相最好了。。。用水更好，反正最好少加甲醇，有一次我用50%甲醇溶樣， 30%甲醇起始濃度，結(jié)果樣品一下子全部泄露了。。悲劇~ 但這和你樣品的性質(zhì)也有關(guān)系，某些樣品，如黃酮苷吧，我感覺(jué)50um的ods對(duì)其吸附能力就比較弱。。。。 實(shí)在水難容的就用臟的ods拌樣，舍不得的話就用硅藻土拌樣，硅藻土是別人教的，，，但是如果是加壓的話，記得中間一定要加個(gè)篩板，別吧硅藻土沖到柱子里了。。 也可以上面接一個(gè)超級(jí)小柱子，專門裝拌好的硅藻土和樣品，我就是這么干的。 |
4樓2012-06-20 21:56:03
mlanqiang
木蟲之王 (文學(xué)泰斗)
藍(lán)博士
- 應(yīng)助: 3409 (副教授)
- 金幣: 55278.8
- 散金: 5498
- 紅花: 62
- 帖子: 73916
- 在線: 730.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 302202
- 注冊(cè): 2006-12-02
- 性別: GG
- 專業(yè): 膠體與界面化學(xué)
5樓2012-06-20 22:34:28
小安妮
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 243.8
- 帖子: 54
- 在線: 27.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 1469363
- 注冊(cè): 2011-10-31
- 專業(yè): 藥物分析
6樓2012-06-21 09:14:36
hinge1001
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 17 (小學(xué)生)
- 金幣: 331.5
- 散金: 10
- 帖子: 253
- 在線: 183.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 1823881
- 注冊(cè): 2012-05-18
- 性別: GG
- 專業(yè): 色譜分析
7樓2012-06-21 09:24:03
長(zhǎng)白山的夢(mèng)
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 40 (小學(xué)生)
- 金幣: 741.7
- 散金: 100
- 紅花: 1
- 帖子: 230
- 在線: 71.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 1228352
- 注冊(cè): 2011-03-10
- 性別: MM
- 專業(yè): 天然藥物化學(xué)
8樓2012-06-21 09:44:03
長(zhǎng)白山的夢(mèng)
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 40 (小學(xué)生)
- 金幣: 741.7
- 散金: 100
- 紅花: 1
- 帖子: 230
- 在線: 71.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 1228352
- 注冊(cè): 2011-03-10
- 性別: MM
- 專業(yè): 天然藥物化學(xué)
9樓2012-06-21 09:56:12
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 長(zhǎng)白山的夢(mèng) 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0703化學(xué) 305求調(diào)劑 +3 | FY_yy 2026-03-14 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +11 | 冬十三 2026-03-15 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +4 | pupcoco 2026-03-17 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑 總分331 +3 | ZY-05 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +9 | yy要上岸呀 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 278求調(diào)劑 +5 | 煙火先于春 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料與化工求調(diào)劑 +6 | 為學(xué)666 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[碩博家園] 湖北工業(yè)大學(xué) 生命科學(xué)與健康學(xué)院-課題組招收2026級(jí)食品/生物方向碩士 +3 | 1喜春8 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 285化工學(xué)碩求調(diào)劑（081700） +9 | 柴郡貓_ 2026-03-12 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿，福州大學(xué)材料專碩339分求調(diào)劑 +3 | 木子momo青爭(zhēng) 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +5 | 時(shí)間點(diǎn) 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 東南大學(xué)364求調(diào)劑 +5 | JasonYuiui 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 070300化學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +6 | 太想進(jìn)步了0608 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 070303 總分349求調(diào)劑 +3 | LJY9966 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 070305求調(diào)劑 +3 | mlpqaz03 2026-03-14 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 294求調(diào)劑 +3 | Zys010410@ 2026-03-13 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 308 085701 四六級(jí)已過(guò)求調(diào)劑 +7 | 溫喬喬喬喬 2026-03-12 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 學(xué)碩285求調(diào)劑 +13 | Wisjxn 2026-03-12 | 46/2300 |
|
|
|
[考研] 材料專碩350 求調(diào)劑 +4 | 王金科 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 277求調(diào)劑 +4 | anchor17 2026-03-12 | 4/200 |
|